PMC

LETTER

På grund av behovet av att minska arbetskostnaderna ersätter många laboratorier den traditionella algoritmen för syfilistestning – screening med ett manuellt nontreponemalt test, följt av ett antikroppstest för anti-Treponema pallidum – med en ”omvänd” algoritm som använder ett automatiserat immunoassay för att screena för anti-T. pallidum IgG-antikroppar. En snabb plasmareagin-titerbestämning (RPR) utförs sedan på IgG-reaktiva prover för att i) verifiera syfilis med en alternativ metod och ii) erhålla en titer för hantering av patienten. Dessutom utför vissa laboratorier också en traditionell treponemalanalys (fluorescerande treponemala antikroppar absorberade eller T. pallidum partikelagglutinationsanalys) på prover som är positiva med en IgG-screeninganalys. Ett antal studier har visat att anti-T. pallidum IgG-immunoassays har en känslighet och specificitet som är jämförbar med andra treponemalassays och icke-tontreponemalassays (1, 3, 4). I likhet med andra högkänsliga screeningtest kan anti-T. pallidum IgG-immunoassays ge falskt positiva resultat, med ett lägre positivt prediktivt värde i populationer med låg prevalens (2). Yen-Lieberman et al. rapporterade nyligen att signalstyrkan (antikroppsindex ) hos Bioplex 2200 syfilis IgG multiplex flödesimmunoassay (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) kan användas för att identifiera sannolika falskt positiva resultat och därmed minska behovet av bekräftande tester (5). De visade att prover med Bioplex AI ≥6,0 alltid var positiva när de testades med en kompletterande enzymimmunoassay (EIA) och föreslog därför en algoritm där endast prover med en Bioplex syfilis IgG AI på <6 utsätts för bekräftande EIA. Deras studie utfördes på prover från en population med låg prevalens men beskrev inte specifika populationskarakteristika. För att ytterligare verifiera effektiviteten av användningen av de kvantitativa Bioplex syfilis IgG-data utvärderade vi AI-resultat från tre olika patientkohorter (intagna personer, kvinnor som besöker obstetriska och gynekologiska kliniker och kvinnor vid förlossning) med avseende på deras förmåga att förutsäga TP-PA-resultat. Uppgifterna stratifierades efter RPR-testresultat. Denna studie godkändes av University of Texas Medical Branch (UTMB) Institutional Review Board.

Vi utförde en retrospektiv granskning av testresultat och patientdata från UTMB:s laboratorieinformationssystem för serumprover som lämnades in för rutinmässig syfilistestning under december 2010 och januari 2011. Totalt 1 849, 3 512 och 873 prover kopplades till fängslade personer, kvinnor som besökte UTMB-kliniker för prenatal eller gynekologisk vård respektive kvinnor vid förlossning. Bland de fängslade personerna kom över 96 % av proverna från män. Fördelningen av proverna efter ras eller etnicitet var följande: Spanska, 49,4 %, afroamerikanska, 27 %, vita/icke-spanska, 21,4 % och andra/okända, 2,2 %. Bland OB/Gyn-patienterna var fördelningen av proverna efter ras eller etnicitet följande: Spanska, 63,1 %, vita/icke-spanska, 21,8 %, afroamerikanska, 12,6 % och andra/okända, 2,5 %. Bland kvinnor som föder på UTMB:s sjukhus var fördelningen av proverna efter individuell ras eller etnicitet följande: Hispanic, 71,8 %; vit/icke-hispanic, 15,8 %; afroamerikansk, 10 %; och annan/okänd, 2,4 %.

Bioplex 2200 syfilis IgG-, RPR- (Sure-Vue; Biokit USA, Inc., Lexington, MA) och TP-PA-testerna (Fujirebio, Inc., Tokyo, Japan) utfördes i enlighet med tillverkarens anvisningar. Bioplex 2200 syfilis IgG-analysen har godkänts av den amerikanska livsmedels- och läkemedelsmyndigheten för användning som en kvalitativ analys. Inledningsvis testades prover med resultat som var tvetydiga (AI = 0,9 till 1,0) eller reaktiva (AI ≥ 1,1) med Bioplex endast med semikvantitativ RPR. I de fall då RPR-testet inte var reaktivt utfördes en TP-PA-analys. Från och med mitten av december 2010 testades alla prover som var tvetydiga eller reaktiva med Bioplex med både semikvantitativ RPR- och TP-PA-test. Bioplex sensitivitet och specificitet, baserat på ett AI-gränsvärde på antingen 6 eller 8, beräknades med hjälp av 2-by-2-kontingenstabeller. TP-PA-analysen betraktades som referensmetod. ROC-analys (Receiver Operating Characteristics) utfördes med hjälp av den webbaserade kalkylatorn som finns på http://www.rad.jhmi.edu/jeng/javarad/roc/JROCFITi.html (tillgänglig den 5 juli 2011).

De anti-T. pallidum IgG-reaktiva frekvenserna som bestämdes med Bioplex-analysen för kohorterna intagna, OB/Gyn och förlossning var 7,5 %, 1,6 % respektive 2,6 % (data visas inte). Förmågan hos Bioplex IgG-analysens AI-värde att förutsäga ett reaktivt TP-PA-resultat varierade beroende på patientkohort och medföljande RPR-titer (tabell 1). Som Yen-Lieberman et al. rapporterade (5) var det mer sannolikt att prover som uppvisade reaktiva RPR-titrar uppvisade reaktiva TP-PA-resultat. Vi utvärderade dock prover med en RPR-titer på 1:1 separat från prover med titrar på ≥2 på grund av kliniska och epidemiologiska bevis som tyder på att en RPR-titer på 1:1 inte alltid är tillräcklig för att bekräfta ett reaktivt IgG-resultat. Våra data visar faktiskt att IgG-reaktiva prover med RPR-titer ≥2 är mer sannolika att bekräftas av TP-PA-analysen. Bland kohorterna för OB/Gyn och förlossning fanns det inga TP-PA-nonreaktiva resultat när RPR-titern var ≥2. Bland kohorterna med intagna och OB/Gyn-kohorterna gav ett AI-gränsvärde på 8 högre specificitet än ett gränsvärde på 6. Yen-Lieberman et al. visade att ett AI-värde på 6 gav 100 % specificitet för deras studiepopulation (5). Även vid en cutoff på 8 nådde specificiteten för Bioplex IgG-analysen i vår studie inte upp till 100 % i den intagna kohorten för prover med RPR-nonreaktiva resultat eller med en titer på 1:1 (som ofta anses vara en ekvivokal titer). Denna kohort löper hög risk för syfilis, med en IgG-reaktivitet på 7,5 %. Bland proverna från intagna personer bekräftades 85,2 % (98/115) av de IgG-reaktiva proverna med TP-PA-analysen (data visas inte). Som jämförelse var IgG-reaktivitetsgraden i OB/Gyn-kohorten 1,6 %. 63,0 % (29/46) av resultaten bekräftades med TP-PA-analysen. För att bedöma effekten av Bioplex syfilis IgG AI cutoff-värdena på testens känslighet och specificitet utfördes en ROC-analys. ROC-analysen visade att syfilis IgG-analysens specificitet för identifiering av TP-PA-konfirmerade prover vanligtvis minskade snabbt vid AI-värden under 8.

Sammanfattningsvis visar vi för första gången användbarheten av kvantitativa Bioplex syfilis IgG-data i olika patientpopulationer och användbarheten av ett gränsvärde för att identifiera prover som kanske inte kräver en ytterligare treponemal analys för bekräftelse. Ett AI-gränsvärde på 8 var nödvändigt för att uppnå maximal specificitet i våra kohorter av intagna och OB/Gyn-kohorter. RPR-titrar på ≥2 är tillräckliga för att antyda att ett reaktivt Bioplex IgG-resultat i både låg- och högriskkohorter utgör en korrekt bestämning av exponering för T. pallidum. Slutligen måste laboratorier som väljer att använda AI-värdet som en del av sitt syfilis IgG-test oberoende verifiera prestandaegenskaperna hos denna modifiering i förhållande till tillverkarens rekommenderade förfarande. Detta är också viktigt eftersom, som vi har visat, det optimala AI-gränsvärdet kan variera beroende på patientpopulationen.

(Dessa uppgifter presenterades delvis vid årsmötet för American Society for Microbiology i New Orleans, LA, i maj 2011.)