Testarea activității enzimatice

Majoritatea proceselor biologice catalizatoare este realizată de enzime care asigură o mare varietate de funcții în interiorul organismelor vii. Acestea sunt indispensabile pentru procesele metabolice, pentru semnalizarea și reglarea celulară și pot genera mișcarea și transportul activ al moleculelor. Reacțiile enzimatice transformă în mod specific moleculele de substrat în produse modificate chimic. Aceste modificări includ degradarea proteolitică sau glicolitică, modificări chimice precum fosforilarea, acilarea, glicozilarea sau procese oxidative și reductive. Activitatea enzimatică dereglementată poate duce la apariția unor stări de boală. Ca urmare, enzimele sunt considerate ținte atractive pentru intervenția farmacologică în terapia medicamentoasă.

Experiența noastră de zeci de ani în proiectarea și fabricarea enzimelor active și a substraturilor acestora sprijină dezvoltarea unui portofoliu în continuă expansiune de teste biochimice. Oferim servicii privind testele enzimatice pentru a asista oamenii de știință axați pe cercetarea enzimelor și a proteinelor:

• Evaluarea cinetică a activității și inhibiției enzimatice.
• Screening și validare de inhibitori.
• Determinarea IC50 a compușilor medicamentoși.
• Studii privind inhibitorii enzimatici care analizează modul de acțiune
• Investigații privind reversibilitatea inhibiției enzimatice
• Profilarea substratului care analizează selectivitatea enzimelor

Sesizările noastre de activitate enzimatică implică mai întâi imunocaptura proteinei de interes, urmată de măsurarea cifrei de afaceri a substratului sau a produsului. Acestea utilizează numai anticorpi monoclonali care au fost examinați pentru a izola enzima în formă activă și în complexe care reprezintă probabil asociațiile lor in situ. Există numeroase avantaje. Enzima este separată de alte proteine care utilizează sau produc aceleași substraturi sau produse analizate, ceea ce permite efectuarea unor teste simple, cum ar fi utilizarea ATP, NADH, piruvat etc., care sunt supuse unor reacții multiple in vivo. Pentru majoritatea enzimelor pentru care avem kituri de testare a activității, oferim, de asemenea, teste Sandwich ELISA de cantitate. Prin combinarea celor două, este posibil să se genereze date specifice de activitate. În plus, deoarece enzima este separată de alte componente celulare, modificările post-traducționale (PTM) pe care le conține în momentul dozării pot fi măsurate, de exemplu, prin spectrometrie de masă ulterioară sau prin reacție cu anticorpi specifici PTM.

.