PMC

LETTER

Din cauza necesității de a reduce costurile cu forța de muncă, multe laboratoare înlocuiesc algoritmul tradițional de testare a sifilisului – depistarea cu un test manual non-treponemal, urmat de un test de anticorpi anti-Treponema pallidum – cu un algoritm „invers” care utilizează un imunodozator automat pentru depistarea anti-T. pallidum IgG. Se efectuează apoi o determinare a titrului de reagină plasmatică rapidă (RPR) pe probele reactive la IgG pentru (i) a verifica sifilisul printr-o metodă alternativă și (ii) a obține un titru pentru gestionarea pacientului. În plus, unele laboratoare efectuează, de asemenea, un test treponemic tradițional (anticorpi treponemici fluorescenți absorbiți sau testul de aglutinare a particulelor de T. pallidum) pe eșantioanele care sunt testate pozitiv printr-un test de screening IgG. O serie de studii au arătat că testele imunologice anti-T. pallidum IgG au sensibilități și specificități comparabile cu cele ale altor teste treponemice și teste netreponemice (1, 3, 4). Ca și în cazul altor teste de depistare foarte sensibile, imunoanalizele anti-T. pallidum IgG pot genera rezultate fals-pozitive, cu o valoare predictivă pozitivă mai mică în populațiile cu prevalență scăzută (2). Yen-Lieberman et al. au raportat recent că intensitatea semnalului (indicele de anticorpi ) al imunotestului în flux multiplex Bioplex 2200 pentru sifilis IgG (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) ar putea fi utilizat pentru a identifica rezultatele probabil fals pozitive și, astfel, pentru a reduce necesitatea testării de confirmare (5). Aceștia au demonstrat că eșantioanele cu IA Bioplex de ≥6,0 au fost întotdeauna pozitive atunci când au fost testate cu un test enzimatic imunoenzimatic (EIA) suplimentar și, prin urmare, au propus un algoritm în care numai eșantioanele cu un IA IgG sifilis Bioplex de <6 sunt supuse unui EIA de confirmare. Studiul lor a fost realizat pe eșantioane dintr-o populație cu prevalență scăzută, dar nu a descris caracteristicile specifice ale populației. Pentru a verifica în continuare eficacitatea utilizării datelor cantitative Bioplex sifilis IgG, am evaluat rezultatele IA din trei cohorte diferite de pacienți (persoane încarcerate, femei care frecventează clinici de obstetrică și ginecologie și femei la naștere) pentru capacitatea lor de a prezice rezultatele TP-PA. Datele au fost stratificate în funcție de rezultatul testului RPR. Acest studiu a fost aprobat de University of Texas Medical Branch (UTMB) Institutional Review Board.

Am efectuat o analiză retrospectivă a rezultatelor testelor și a datelor pacienților din sistemul de informații de laborator al UTMB pentru probele de ser trimise pentru teste de rutină pentru sifilis în decembrie 2010 și ianuarie 2011. Un total de 1.849, 3.512 și 873 de specimene au fost legate de persoane încarcerate, femei care au frecventat clinicile UTMB pentru îngrijire prenatală sau ginecologică și, respectiv, femei la naștere. Dintre persoanele încarcerate, peste 96% dintre specimene proveneau de la bărbați. Distribuția specimenelor în funcție de rasa sau etnia individului a fost următoarea: hispanici, 49,4 %; afro-americani, 27 %; albi/nehispanici, 21,4 %; și alții/necunoscuți, 2,2 %. În rândul pacientelor OB/GYN, distribuția specimenelor în funcție de rasă sau etnie individuală a fost următoarea: hispanici, 63,1 %; albi/nehispanici, 21,8 %; afro-americani, 12,6 %; și alții/neștiuți, 2,5 %. În rândul femeilor care au născut la spitalul UTMB, distribuția specimenelor în funcție de rasă sau etnie individuală a fost următoarea: hispanici, 71,8%; albi/nehispanici, 15,8%; afro-americani, 10%; și alții/neștiuți, 2,4%.

Testările Bioplex 2200 sifilis IgG, RPR (Sure-Vue; Biokit USA, Inc., Lexington, MA) și TP-PA (Fujirebio, Inc., Tokyo, Japonia) au fost efectuate în conformitate cu instrucțiunile producătorilor. Testul Bioplex 2200 pentru sifilis IgG a fost autorizat de Food and Drug Administration din SUA pentru a fi utilizat ca test calitativ. Inițial, probele cu rezultate echivoce (IA = 0,9 până la 1,0) sau reactive (IA ≥ 1,1) prin Bioplex au fost testate doar prin RPR semicuantitativ. În cazurile în care testul RPR a fost nereactiv, s-a efectuat un test TP-PA. Începând cu jumătatea lunii decembrie 2010, toate probele care au fost echivoce sau reactive prin Bioplex au fost testate atât prin testul RPR semicuantitativ, cât și prin testul TP-PA. Sensibilitatea și specificitatea Bioplex, bazate pe o valoare de referință AI de 6 sau 8, au fost calculate cu ajutorul tabelelor de contingență 2 câte 2. Testul TP-PA a fost considerat metoda de referință. Analiza caracteristicilor de funcționare a receptorului (ROC) a fost efectuată cu ajutorul calculatorului bazat pe web disponibil la http://www.rad.jhmi.edu/jeng/javarad/roc/JROCFITi.html (accesat la 5 iulie 2011).

Ratele de reactivitate IgG anti-T. pallidum determinate de testul Bioplex pentru cohortele încarcerate, OB/Gyn și de naștere au fost de 7,5 %, 1,6 % și, respectiv, 2,6 % (datele nu sunt prezentate). Capacitatea valorii IA a testului Bioplex IgG de a prezice un rezultat reactiv al TP-PA a variat în funcție de cohorta de pacienți și de titrul RPR însoțitor (tabelul 1). Așa cum au raportat Yen-Lieberman et al. (5), probele care au prezentat titruri RPR reactive au fost mai susceptibile de a prezenta rezultate TP-PA reactive. Cu toate acestea, am evaluat probele cu un titru RPR de 1:1 separat de cele cu titru ≥2, din cauza dovezilor clinice și epidemiologice care indică faptul că un titru RPR de 1:1 nu este întotdeauna suficient pentru a confirma un rezultat IgG reactiv. Într-adevăr, datele noastre arată că este mai probabil ca probele reactive la IgG cu titru RPR ≥2 să fie confirmate prin testul TP-PA. În rândul cohortelor OB/Gyn și de naștere, nu au existat rezultate TP-PA non-reactive atunci când titrul RPR a fost ≥2. În rândul cohortelor încarcerate și OB/Gyn, un cutoff AI de 8 a oferit o specificitate mai mare decât un cutoff de 6. Yen-Lieberman et al. au arătat că un AI de 6 a oferit o specificitate de 100 % pentru populația studiată de ei (5). Chiar și la un cutoff de 8, specificitatea testului Bioplex IgG din studiul nostru nu a reușit să atingă 100% în cohorta încarcerată pentru probele cu rezultate RPR non-reactive sau cu un titru de 1:1 (considerat adesea un titru echivoc). Această cohortă prezintă un risc ridicat de sifilis, cu o rată de reactivitate IgG de 7,5%. Dintre probele provenite de la persoanele încarcerate, 85,2 % (98/115) dintre probele IgG-reactive au fost confirmate prin testul TP-PA (datele nu sunt prezentate). În comparație, rata de reactivitate IgG în cohorta OB/Gyn a fost de 1,6%; 63,0% (29/46) dintre rezultate au fost confirmate prin testul TP-PA. Pentru a evalua efectul valorilor de cutoff Bioplex sifilis IgG AI asupra sensibilității și specificității testelor, s-a efectuat o analiză ROC. Analiza ROC a arătat că, de obicei, specificitatea testului sifilis IgG pentru identificarea probelor confirmate prin TP-PA a scăzut rapid la valori ale IA mai mici de 8.

În concluzie, demonstrăm pentru prima dată utilitatea datelor cantitative Bioplex sifilis IgG în diferite populații de pacienți și utilitatea unei valori limită pentru a identifica specimenele care ar putea să nu necesite un test treponemic suplimentar pentru confirmare. Un cutoff AI de 8 a fost necesar pentru a obține o specificitate maximă în cohortele noastre încarcerate și OB/Gyn. Titrurile RPR de ≥2 sunt suficiente pentru a sugera că un rezultat reactiv Bioplex IgG, atât în cohortele cu risc scăzut, cât și în cele cu risc ridicat, reprezintă o determinare exactă a expunerii la T. pallidum. În cele din urmă, laboratoarele care aleg să utilizeze valoarea AI ca parte a testului lor IgG pentru sifilis trebuie să verifice în mod independent caracteristicile de performanță ale acestei modificări față de procedura recomandată de producător. Acest lucru este, de asemenea, important deoarece, așa cum am arătat, valoarea optimă de tăiere a AI poate varia în funcție de populația de pacienți.

(Aceste date au fost prezentate parțial la Reuniunea anuală a Societății Americane de Microbiologie din New Orleans, LA, în mai 2011.)

.