Yeast Cells Under the MicroscopeCharacteristics, Habitat and Observation

What is Yeast?

Komórki drożdży są członkami królestwa grzybów. Są to jednokomórkowe mikroorganizmy (eukariotyczne) zaliczane do gromad Ascomycota (grzyby workowe) i Basidiomyota (grzyby wyższe), z których obie wchodzą w skład podkrólestwa Dikarya.

Komórki drożdży

• Kingdom – Fungus
• Subkingdom – Kikarya
• Phyla – Ascomycota andBasidiomycota

* Drożdże pączkujące, określane również jako drożdże prawdziwe, należą do Phylum Acomycota i do rzędu Saccharomycetales

Drożdże są bardzo zróżnicowane (ponad 1500 gatunków), przy czym większość z nich tworzy phylum Ascomycota, podczas gdy tylko kilka jest klasyfikowanych jakoBasidiomycota. Komórki drożdży rozmnażają się przez pączkowanie lub rozszczepienie binarne, które są obiema metodami rozmnażania bezpłciowego (Horst, 2010).

Pączkowanie – nowa komórka drożdży powstaje w wyniku mitotycznego podziału komórki i pozostaje przyczepiona jako pączek do starej komórki, dopóki się nie rozdzieli i nie stanie się niezależna.W tym przypadku komórka rodzicielska wytwarza wyrostek, który w końcu rozdziela się, by stać się niezależną komórką identyczną z komórką rodzicielską.

Rozszczepienie binarne – W rozszczepieniu binarnym nie powstaje wyrostek (pączek). Raczej, poprzez mitozę, genom replikuje się i dzieli, a następnie tworzy nową błonę plazmatyczną i ostatecznie komórka dzieli się na dwie, tworząc dwie nowe komórki z komórki macierzystej.

* Niektóre z grzybów określanych jako dimorficzne mają tendencję do naprzemiennego przechodzenia z fazy drożdży do fazy hyfusów, co oznacza, że mogą rosnąć jako hyfusy (nitkowate)

Siedlisko

Ponieważ są bardzo zróżnicowane, drożdże można znaleźć w wielu różnych siedliskach, szczególnie w środowiskach bogatych w cukier. Można je znaleźć na kwiatach, liściach roślin i owocach, jak również na glebie, w środowiskach głębinowych, na powierzchni skóry, a nawet w przewodach pokarmowych zwierząt (ciepłokrwistych).

Choć można je znaleźć w wielu środowiskach, drożdże wymagają wilgotnych środowisk z wystarczającą ilością prostych i rozpuszczalnych składników odżywczych, aby wspierać wzrost i rozmnażanie (Horst, 2010).

While takie drożdże jak Candica może causeinfections (Candidiasis) istnieją użyteczne drożdże, takie jak:

• Drożdże piekarskie
• Drożdże odżywcze
• Drożdże piwowarskie
• Drożdże gorzelnicze i winiarskie

Drożdże pod mikroskopem

Wymagania

.

• Woda
• Ciasto drożdżowe
• Kropidło
• Szkiełka szklane i szkiełka nakrywkowe
• Składniki (podane poniżej)

Ciasto drożdżowe zawiera Saccharomyces Cerevisiae(grzyb żywiący się cukrem) i dlatego może być używane do badania drożdży.(grzyby żywiące się cukrem) i dlatego mogą być użyte do uzyskania drożdży do obserwacji pod mikroskopem. Poniżej przedstawiono procedurę, która może być zastosowana do przygotowania próbki do obserwacji.

• Uzyskać ciasto drożdżowe (można je kupić w specjalistycznych sklepach piekarniczych lub supermarketach)
• Odciąć mały kawałek ciasta drożdżowego i wymieszać z wodą do uzyskania konsystencji pasty
• Dodać trochę więcej wody do uzyskania roztworu
• Używając wkraplacza, zebrać i umieścić kroplę roztworu na szkiełku mikroskopowym
• Założyć szkiełko nakrywkowe i obserwować pod obiektywem o dużej mocy

Mikroskopem Brightfield

Podczas oglądania próbki w dużym powiększeniu (1000x i powyżej) można zobaczyć owalne (jajowate) organizmy, które są drożdżami. Możliwe jest również zaobserwowanie pączków, które można zobaczyć na niektórych komórkach drożdży.

Jeśli roztwór zawierał trochę cukru, można zauważyć pęcherzyki w próbce, które są wynikiem procesu fermentacji przez mikroorganizmy.

Mikroskopia fluorescencyjna

Mikroskopia fluorescencyjna może być wykorzystywana do celów obserwacji organelli wewnątrz komórek drożdży. Jest to szczególnie doskonała metoda, dzięki której studenci mogą zobaczyć wewnątrzkomórkową dystrybucję komórek i zidentyfikować różne typy organelli komórkowych.

W przypadku drożdży może to stanowić pewne wyzwanie, ponieważ mają one bardzo mały rozmiar (w porównaniu z innymi komórkami) i posiadają ścianę komórkową(Chalfie i Kain, 2005).

W przypadku żywych komórek drożdży, należy użyć szeregu barwników w celu zwiększenia kontrastu i umożliwienia rozróżnienia różnych organelli w komórkach.

Należą do nich:

• DAPI dla jąder
• FM4-.64 dla wakuoli
• DIOC6 dla endoplazmicreticulum i mitochondriów
• DASPMI dla mitochondriów
• Calcofluor White, który pomaga wybarwić ścianę komórkową

Drożdże należą do najmniejszych komórek eukariotycznych o średnicy od 5 do 10um. Z tego powodu ważne jest, aby oglądać je w dużym powiększeniu przy użyciu mikroskopii fluorescencyjnej.

W tym przypadku do obserwacji wizualnej i uzyskania maksymalnej jasności i rozdzielczości zalecane są obiektywy 60x lub 100x z przysłoną numeryczną 1,4.

Jeżeli rejestracja odbywa się przy użyciu kamery cyfrowej (np. przy użyciu kamery o pikselu kwadratowym 6,8 x 6,8 um), wówczas zalecane jest powiększenie 60x z przysłoną numeryczną 1.4 (Hašek, 2006).

Zobacz także:

Mykologia ogólnie jako dziedzina nauki

Grzyby – rodzaje, morfologia i struktura, zastosowania i wady

Patrząc dalej na pleśń pod mikroskopem.

Powrót od Drożdży pod Mikroskopem do Eksperymentów Mikroskopowych

Powrót do Domu MicroscopeMaster

.