Enzyme Activity Assay

Zdecydowana większość katalizowania procesów biologicznych jest wykonywana przez enzymy, które zapewniają szeroką gamę funkcji wewnątrz organizmów żywych. Są one niezbędne w procesach metabolicznych, sygnalizacji i regulacji komórkowej oraz mogą generować ruch i aktywny transport cząsteczek. Reakcje enzymatyczne specyficznie przekształcają cząsteczki substratów w chemicznie zmodyfikowane produkty. Modyfikacje te obejmują degradację proteolityczną lub glikolityczną, modyfikacje chemiczne takie jak fosforylacja, acylacja, glikozylacja lub procesy oksydacyjne i redukcyjne. Zaburzona aktywność enzymów może prowadzić do stanów chorobowych. W rezultacie enzymy są uważane za atrakcyjne cele interwencji farmakologicznej w terapii lekowej.

Nasze kilkudziesięcioletnie doświadczenie w projektowaniu i produkcji aktywnych enzymów i ich substratów wspiera rozwój coraz szerszego portfolio testów biochemicznych. Świadczymy usługi w zakresie testów enzymatycznych, aby pomóc naukowcom skupionym na badaniach nad enzymami i białkami:

• Kinetyczna ocena aktywności enzymów i inhibicji.
• Wyszukiwanie i walidacja inhibitorów.
• Określanie wartościIC50 związków farmakologicznych.
• Badania inhibitorów enzymów analizujące sposób działania
• Badania odwracalności inhibicji enzymów
• Profilowanie substratów analizujące selektywność enzymów

Nasze testy aktywności enzymów obejmują najpierw immunokapsułkowanie interesującego nas białka, a następnie pomiar obrotu substratu lub produktu. Wykorzystują one wyłącznie przeciwciała monoklonalne, które zostały przebadane w celu wyizolowania enzymu w formie aktywnej i w kompleksach, które prawdopodobnie reprezentują ich związki in situ. Ma to wiele zalet. Enzym jest oddzielony od innych białek, które wykorzystują lub produkują te same substraty lub produkty, co pozwala na proste badania, takie jak wykorzystanie ATP, NADH, pirogronianu i innych, które są przedmiotem wielu reakcji in vivo. Dla większości enzymów, dla których mamy zestawy do oznaczania aktywności, zapewniamy również testy ELISA Sandwich o odpowiedniej ilości. Poprzez połączenie tych dwóch metod możliwe jest wygenerowanie specyficznych danych dotyczących aktywności. Ponadto, ponieważ enzym jest oddzielony od innych składników komórkowych, modyfikacje potranslacyjne (PTM), które zawiera w czasie badania, mogą być mierzone np. za pomocą późniejszej spektrometrii masowej lub reakcji z przeciwciałami specyficznymi dla PTM.