Gistcellen onder de microscoop – Eigenschappen, habitat en waarneming

Wat is een gist?

Gistcellen behoren tot het Schimmelrijk. Het zijn eencellige micro-organismen (eukaryoten) die worden ingedeeld in de fyla Ascomycota (zakschimmels) en Basidiomyota (hogere schimmels), die beide vallen onder het subdistrict Dikarya.

Gistcellen

• Kingdom – Schimmel
• Subkoninkrijk – Kikarya
• Phyla – Ascomycota enBasidiomycota

* Budding gist, ook echte gist genoemd, vallen onder het phylum Acomycota en in de orde Saccharomycetales

Gisten zijn zeer divers (meer dan 1.500 soorten), waarvan de meeste tot het phylum Ascomycota behoren, terwijl slechts enkele tot de Basidiomycota worden gerekend. Gistcellen planten zich voort door knopvorming of binaire splijting, beide methoden van ongeslachtelijke voortplanting (Horst, 2010).

Budding – Een nieuwe gistcel wordt gevormd door mitotische celdeling en blijft als een knop aan de oude cel vastzitten totdat deze zich splitst en zelfstandig wordt.Hier produceert de moedercel een uitgroeisel dat zich uiteindelijk splitst tot een onafhankelijke cel die identiek is aan de moedercel.

Binaire splijting – Bij binaire splijting wordt geen uitgroeisel (knop) gevormd. In plaats daarvan repliceert en deelt het genoom zich via mitose, gevolgd door de vorming van een nieuw plasmamembraan en uiteindelijk de deling van de cel in tweeën om uit de moedercel twee nieuwe cellen te vormen.

* Sommige van de schimmels die dimorf worden genoemd, hebben de neiging af te wisselen tussen de gist- en de hyfenfase, wat betekent dat ze ook kunnen groeien als hyfen (draadvormige)

Habitat

Omdat ze zeer divers zijn, kunnen gisten in een grote verscheidenheid van habitats worden aangetroffen, met name in omgevingen met suikerrijk materiaal. Ze kunnen worden aangetroffen op bloemen, plantenbladeren en vruchten, maar ook in de bodem, diepzeemilieus, op het huidoppervlak en zelfs in de darmkanalen van dieren (warmbloedigen).

Hoewel ze in veel omgevingen kunnen worden aangetroffen, hebben gisten een vochtige omgeving nodig met voldoende hoeveelheden eenvoudige en oplosbare voedingsstoffen om de groei en vermenigvuldiging te ondersteunen (Horst, 2010).

Weliswaar kunnen gisten zoals de Candica infecties veroorzaken (Candidiasis), maar er zijn ook nuttige gisten zoals:

• Bakkersgist
• Nutritionele gist
• Brouwersgist
• Distilleer- en Wijngist

Gist onder de Microscoop

Voorschriften

• Water
• Gistcake
• Druppelaar
• Glasglaasjes en dekglaasjes
• Schimmels (hieronder vermeld)

Gistcake bevat Saccharomyces Cerevisiae (suiker-etende schimmel) en kan dus worden gebruikt om de gist te verkrijgen die onder de microscoop kan worden geobserveerd. Hieronder volgt een procedure die kan worden gebruikt om het monster voor te bereiden voor observatie.

• Verzamel gistkoek (deze kan worden gekocht bij bakkersspeciaalzaken of een supermarkt)
• Snijd een klein stukje gistkoek en meng dit met water tot een deegachtige textuur
• Voeg nog een beetje water toe om een oplossing te vormen
• Gebruik een druppelaar, een druppel van de oplossing op een objectglaasje
• Doe een dekglaasje op de microscoop en observeer onder een sterk objectief

Met helderveldmicroscopie

Bij het bekijken van het monster onder sterke vergroting (1000x en hoger) ziet men ovale (eivormige) organismen, die de gist zijn. Het is ook mogelijk de knoppen waar te nemen, die op sommige gistcellen te zien zijn.

Als de oplossing wat suiker bevatte, zal men ook enkele belletjes in het preparaat waarnemen, die het resultaat zijn van het gistingsproces door de micro-organismen.

Met fluorescentiemicroscopie

Fluorescentiemicroscopie kan worden gebruikt om de organellen in de gistcellen te observeren. Dit is met name een geweldige methode waarmee studenten kunnen krijgen om de intracellulardistributie van de cel te bekijken en de verschillende soorten celorganellen te identificeren.

Bij gist kan dit een kleine uitdaging zijn, omdat gist zeer klein is (vergeleken met andere cellen) en een celwand heeft (Chalfie and Kain, 2005).

Voor levende gistcellen moet een aantal kleurstoffen worden gebruikt om het contrast te vergroten en de verschillende organellen in de cellen te kunnen onderscheiden.

Deze omvatten:

• DAPI voor de kernen
• FM4-64 voor de vacuolen
• DIOC6 voor het endoplasmatischreticulum en de mitochondriën
• DASPMI voor de mitochondriën
• Calcofluor White waarmee de celwand kan worden gekleurd

Gist behoort tot de kleinste eukaryote cellen, met diameters tussen 5 en 10um. Daarom is het belangrijk ze onder hoge vergroting te bekijken met behulp van fluorescentiemicroscopie.

Hierbij worden 60x of 100x objectieven met een numerieke apertuur van 1,4 aanbevolen voor respectievelijk visuele waarneming en maximale helderheid en resolutie.

Als opnamen worden gemaakt met een digitale camera (bv. met een 6,8 x 6,8 um sq pixel camera), wordt een vergroting van 60x aanbevolen met een numerieke apertuur van 1.4 (Hašek, 2006).

Zie ook:

Mycologie in het algemeen als studiegebied

Fungi – Soorten, Morfologie en Structuur, Gebruik en Nadelen

Schimmels onder de Microscoop verder bekijken.

Terug van Gist onder de Microscoop naar Microscoop Experimenten

Terug naar MicroscoopMaster Home