Verme al microscopio
Il Settembre 30, 2021 da adminUn esperimento divertente è osservare un verme al microscopio. I vermi esistono da centinaia di milioni di anni. In questo tempo, si sono evoluti (mentre altri si distinguevano) nei vermi che vediamo oggi.
Secondo un articolo pubblicato sul National Geographic nel 2018, per esempio, un fossile (di circa 500 milioni di anni) di un verme setoloso scoperto nella Columbia Britannica ha rivelato che l’organismo conteneva numerosi piccoli peli (per nuotare) e un paio di palpi tubolari sulla testa (organi sensoriali). Anche se l’organismo non esiste più oggi, sanguisughe e lombrichi sono i suoi discendenti.
Charles Darwin, considerato il padre del pensiero evolutivo, era particolarmente affascinato dai lombrichi e dedicò del tempo a studiarne la vita e il comportamento. Attraverso i suoi studi, fu in grado di determinare come si comportano, il tipo di cibo che preferiscono e la loro anatomia, tra molte altre caratteristiche. Attraverso i loro meandri nella terra (nel suolo) e le loro abitudini alimentari, Darwin fu anche in grado di spiegare i loro benefici nell’agricoltura.
* Nota interessante: nei primi anni della microscopia, gli spermatozoi erano considerati vermi parassiti (chiamati vermi spermatici) da alcuni scienziati e filosofi.
Introduzione generale ai vermi
In sostanza, i vermi sono animali invertebrati che si dividono in tre gruppi principali: vermi piatti, vermi tondi e vermi segmentati. Anche se variano in forma e dimensioni, i vermi sono caratterizzati da un corpo allungato/sottile, morbido e bilateralmente simmetrico. Sono anche privi di gambe e quindi si muovono strisciando sulle superfici usando una serie di muscoli. Tuttavia, alcune specie possiedono strutture simili a peli coinvolte nel movimento.
I vermi possono essere trovati in una varietà di habitat in tutto il mondo. Per esempio, mentre vermi come i lombrichi possono essere trovati in molti ambienti terrestri umidi (nel suolo o nel materiale organico in decomposizione), i policheti sono abbondanti negli habitat marini.
I vermi tubo (Riftia pachyptila), d’altra parte, possono essere trovati sul fondo del mare dove formano una relazione simbiotica con batteri di zolfo. Altri vermi esistono come parassiti e possono essere trovati in piante e animali.
Alcune altre caratteristiche associate ai vermi includono:
- Hanno una cavità corporea nota come celoma
- La maggior parte delle specie ha un sistema digestivo
- Hanno un sistema nervoso
- I corpi sono formati dagli strati germinali primari
Alcuni esempi di vermi includono:
- Vermi della terra
- Leeche
- Vermi policheti
- Pseudobiceros filgor
- Verme piatto dalle papille gialle
- Vermi degli uncini
Obiettivi
L’obiettivo principale dell’osservazione di un verme al microscopio è confrontare un membro di ogni gruppo di vermi (vermi piatti, vermi tondi e vermi segmentati). Questo permetterà agli studenti di determinare alcune delle somiglianze e differenze tra questi vermi. Alla fine di queste attività, gli studenti dovrebbero essere in grado di:
Sapere come usare un microscopio per osservare gli esemplari
Capire come preparare gli esemplari per la microscopia
Confrontare e contrastare la morfologia dei tre gruppi di vermi
Prima di osservare il verme al microscopio, si consiglia sempre di usare una lente di ingrandimento per avere un’idea generale dell’aspetto del campione.
Anche se una lente di ingrandimento ha un potere di ingrandimento inferiore rispetto a un microscopio, ti permetterà di ingrandire l’immagine più volte per avere un’idea della morfologia generale.
Requisiti/Materiali:
– Lente di ingrandimento – Una tipica lente di ingrandimento ha un potere di ingrandimento tra 1× e 2×
– Piastra di Petri
– Coppia di pinzette
– Campione: Earthworm (verme segmentato), un Planarian flatworm, e Eelworms (vermi tondi)
– Coppia di guanti (gomma nitrilica)
– Contenitore
– Setaccio
– Mini Pala da giardino
* I tre tipi di vermi sono stati selezionati perché possono essere facilmente trovati (Earthworms; si trovano nei giardini e nel terreno sciolto, i vermi piatti planari possono essere trovati in acque poco profonde, stagni e fiumi, mentre i vermi dell’anguilla possono essere trovati infettando varie colture e.Ad esempio i pomodori) e sono sicuri da maneggiare. Inoltre, rappresentano ogni gruppo e renderanno facile il processo di confronto.
Procedura: raccolta del campione
– Per raccogliere il campione, puoi usare un paio di guanti. Tuttavia, questo è facoltativo dato che questi vermi sono innocui per la maggior parte.
– Usando una mini pala da giardino, scava delicatamente intorno al tuo giardino o al terreno umido per trovare uno o più lombrichi.
– Usando un paio di pinzette, raccogli delicatamente i lombrichi e mettili in una capsula di Petri (potresti dover coprire parzialmente la capsula di Petri per evitare che scappino).
– Per raccogliere i vermi piatti (Planarian flatworms) usa un contenitore per attingere acqua da uno stagno o fiume poco profondo. Qui, dovrai dare un’occhiata più da vicino (puoi usare la lente d’ingrandimento) all’acqua nel contenitore per vedere se sei riuscito a prendere il verme. Questo perché sono di piccole dimensioni, da 3 a 15 mm di lunghezza. A seconda della specie, possono essere di colore nero, grigio o marrone.
– Una volta che sei sicuro di aver raccolto i vermi piatti nel tuo contenitore, puoi setacciare l’acqua per raccogliere facilmente il verme e tenerli in una piastra di Petri (assicurati che ogni tipo di verme sia tenuto in una piastra di Petri diversa) – Puoi aggiungere un po’ d’acqua nella piastra di Petri per conservare i vermi.
– Rispetto agli altri due, raccogliere i vermi dell’anguilla può risultare difficile, dato che sono appena visibili (0,4-1,2 mm) ad occhio nudo. Tuttavia, i vermi possono essere raccolti identificando un raccolto infetto (pomodori o rabarbaro, patate, ecc.).
Per raccogliere i vermi dell’anguilla, si possono usare i seguenti passi:
– Rompere delicatamente la parte infetta del raccolto (per esempio foglie) in piccoli pezzi
– Mettere le foglie in un contenitore di vetro con acqua per circa 30 minuti
– Dopo 30 minuti, osserverai i vermi (in un gruppo) muoversi sul fondo del contenitore
– Versa delicatamente l’acqua facendo attenzione a non perdere la massa di vermi
– Puoi conservare i vermi nel contenitore o versarli delicatamente in una capsula di Petri con una piccola quantità d’acqua
– Una volta che hai raccolto l’intero campione in ogni capsula di Petri, osservare attentamente usando la lente d’ingrandimento – Questo può essere fatto mentre i vermi sono nella capsula di Petri
Osservazione
Sotto una lente d’ingrandimento, i segmenti lungo tutta la lunghezza del corpo del verme saranno chiaramente evidenti. Questi segmenti permettono all’organismo di torcersi e muoversi. Se state osservando il verme sotto una buona illuminazione, potreste anche essere in grado di identificare vagamente alcuni organi interni del verme (ad esempio i vasi). Tuttavia, alcune specie possono avere un’epidermide più scura che rende difficile vedere qualcosa.
Nella parte anteriore del corpo, noterete un morto stretto e appuntito (più piccolo rispetto agli altri segmenti del corpo). Vicino alla parte centrale del corpo, noterete anche un segmento distinto che appare gonfio e di colore più chiaro rispetto agli altri segmenti. Questo è conosciuto come il clitello ed è coinvolto nella riproduzione.
Alcune delle altre parti che possono essere rilevate utilizzando la lente di ingrandimento includono:
- Setae – strutture simili a capelli su ogni segmento
- Corpo cilindrico
Vermi piatti planari
Anche se hanno un corpo allungato, questi vermi piatti sono molto più piccoli (da 3 a 15 mm) rispetto ai lombrichi con un corpo appiattito (tipo foglia). Rispetto alla parte anteriore (che può essere larga) l’estremità posteriore (coda) è più appuntita. Uno sguardo più ravvicinato può anche rivelare delle macchie oculari nella regione della testa così come una faringe situata vicino al centro (parte centrale del corpo)
Anguille
Per quanto riguarda i lombrichi e le planarie, le anguille hanno dimensioni significativamente ridotte. Per questo motivo, sarebbe difficile differenziare le diverse parti del corpo sotto la lente d’ingrandimento. Tuttavia, possono essere visti muoversi in gruppo.
Il lombrico al microscopio
Utilizzando un microscopio, sarete in grado di osservare sia l’anatomia esterna che interna (attraverso la dissezione) del lombrico.
Requisiti/Materiali
- Campione di lombrico
- Soluzione alcolica
- Microscopio
- Vetri di vetro
- Acqua
- Un paio di pinzette
Procedura di preparazione
– Metti una soluzione di alcol (1 parte di alcol e 9 parti di acqua) in una capsula di Petri
– Usando un paio di pinzette, prendere uno dei lombrichi e metterlo nella soluzione alcolica – Questo passo ha lo scopo di uccidere il lombrico in preparazione per la microscopia
– Prendere il lombrico e metterlo in acqua (capsula Petri con acqua) – Questo passo ha lo scopo di lavare via qualsiasi sporcizia o muco sull’epidermide
Microscopia stereo
Per osservare l’anatomia esterna del verme, può essere usato uno stereomicroscopio:
Procedura
– Mettere il verme in una capsula di Petri
– Girare la torretta girevole per mettere in posizione l’obiettivo a più basso ingrandimento
– Mettere con attenzione la capsula di Petri sul palcoscenico
– Mentre si guarda attraverso l’oculare, girare delicatamente la manopola di messa a fuoco per mettere a fuoco l’immagine
– È possibile regolare l’intensità della luce regolando il condensatore
– Una volta che l’immagine è a fuoco, cerca di trovare l’estremità anteriore del verme e poi muovi il palcoscenico per indagare l’anatomia del resto del corpo
– Regola ad alto ingrandimento e ripeti il processo per dare un’occhiata più da vicino al verme e registra le tue osservazioni
* I passi precedenti possono essere ripetuti con un lombrico vivo per osservare il movimento del verme (come si muovono il corpo e l’apparato boccale).
Osservazione
Sotto una maggiore potenza di ingrandimento, si può vedere una protuberanza carnosa nella parte anteriore del verme. Questo è conosciuto come il prostomio e si trova intorno alla parte della bocca del verme. L’ano si trova nella parte posteriore. Al microscopio, si può anche vedere un setto che separa i piccoli segmenti del corpo del verme.
Rispetto alla parte dorsale, si nota anche che la superficie ventrale (che è arrotondata e più scura) del verme è più piatta. D’altra parte, le setole (piccole setole simili a capelli) e i pori (pori su ogni segmento del corpo) saranno anche facilmente visibili. Oltre ai pori sui segmenti del corpo, si dovrebbe anche ottenere un’immagine chiara dei pori più grandi (pori genitali) vicino alla parte anteriore del verme.
Dissezione del lombrico
Sezionare il lombrico renderà più facile studiare la sua anatomia interna.
Requisiti/Materiali
- Spilli per dissezione
- Specimen
- Lama o forbici per dissezione
- Microscopio
- Vassoio di dissezione
- Poppia di pinze
Procedura
- Posizionare il campione sul vassoio di dissezione con la sua dorsale rivolta verso l’alto
- Utilizzando i perni di dissezione, fissare ogni estremità in posizione – Questo comporterà il fissaggio di entrambe le estremità del campione in modo che rimanga in posizione durante la dissezione
- Utilizzando la lama, tagliare con attenzione una piccola apertura sotto il clitello
- Utilizzando il forcipe, sollevare la pelle in modo da poter inserire facilmente le forbici da dissezione e tagliare l’epidermide lungo una linea retta verso la testa e di nuovo verso l’estremità posteriore
- Utilizzando il forcipe, staccare l’epidermide e appuntarla con cura nel vassoio – Questo richiederà diversi spilli per assicurare che l’anatomia interna del verme possa essere chiaramente vista
* Osservare l’esemplare al microscopio seguendo i passi precedenti.
Osservazione
Al microscopio, sarà possibile identificare diverse caratteristiche dell’anatomia interna.
Queste includono:
– Archi aortici (cuore) – Cinque anelli scuri che circondano l’esofago servono come cuore del verme
– Faringe – si trova nella parte anteriore del verme all’interno della bocca. Consiste di diversi muscoli e apparirà come un organo leggermente colorato
– Organi riproduttivi – si trovano vicino al cuore, apparirà come un tessuto leggermente colorato o piccoli organi bianchi
– Ventriglio – si trova dietro il gozzo (serve per conservare il cibo)
– Intestino – un lungo tubo che va dal ventriglio verso la parte posteriore del corpo
– Midollo nervoso centrale – si trova sulla parte dorsale del corpo, può essere facilmente visto spostando l’intestino di lato (Il cordone nervoso apparirà come un lungo cordone bianco)
Verme piatto planare al microscopio
Preparazione di vetrini provvisori
- Vetri per microscopio
- Coprivetrino per microscopio
- Agar
- Microscopio composto
- Vaselina
- Acqua
Procedura
* Questa tecnica è usata per osservare i vermi vivi
– Aggiungere una goccia di agar caldo (dal 4 al 5% di agar) su un vetrino pulito – L’agar usato per questa tecnica consiste in Oxoid Agar Technical e solfato rameico
– Usando un altro vetrino pulito, appiattire l’agar
– Una volta che l’agar si è fissato, rimuovere delicatamente il vetrino (vetrino usato per appiattire l’agar)
– Usando un contagocce, aggiungere una goccia d’acqua sull’agar
– Introdurre con attenzione il verme piatto sulla goccia d’acqua e coprire con un coprioggetto
* Per evitare che il verme piatto si muova, si può aggiungere un po’ di vasellina sul bordo del coprioggetto prima di premerlo delicatamente: facendo attenzione a non schiacciare il campione.
Microscopia
Una volta preparato il vetrino, l’osservazione del campione al microscopio è il passo successivo.
Questo comporta i seguenti passi:
– Prima di montare il vetrino, ruotare la torretta per mettere in posizione l’obiettivo di potenza più bassa
– Posizionare con attenzione la slitta sul tavolino e tenerla in posizione con le clip
– Guardare attraverso l’oculare e girare la manopola di messa a fuoco per mettere a fuoco l’immagine
– Usando la manopola di regolazione del tavolino, spostare delicatamente il palcoscenico per vedere diverse parti del campione
– Passare a un ingrandimento maggiore e osservare il campione
– Abbassare il palcoscenico prima di rimuovere il vetrino
Osservazione
Usando un microscopio, si noterà che il corpo di questo verme appare appiattito (simile a una foglia piatta allungata). Si possono anche osservare le macchie oculari, situate nella parte della testa (parte anteriore del verme). Questi tagli pigmentati sono sensibili alla luce del sole e quindi funzionano come occhi.
A seconda della specie, la testa può essere appuntita sui lati. Queste punte sono conosciute come orecchiette e servono come strutture sensoriali coinvolte nell’olfatto e nel tatto. Nella sezione centrale, potrebbe anche essere possibile individuare la faringe coinvolta nell’alimentazione.
Vermi tondi (vermi rotondi) al microscopio
I vermi dell’anguilla sono molto più piccoli rispetto agli altri vermi discussi sopra. Possono essere coltivati utilizzando mezzi di coltura prima di essere ispezionati con un microscopio.
Requisiti/Materiali
- Aceto di sidro di mele
- Anguille all’aceto
- Piatto di cultura di vetro
- Pipetta
- Mela
Procedura
– Usando una pipetta, aggiungere circa 200ml di aceto in un piatto di coltura di vetro pulito
– Tagliare alcune fette di mele e aggiungerle nel piatto di vetro
– Introdurre i vermi nel contenitore e coprire (coprire il contenitore (coprire il contenitore per rallentare l’evaporazione)
– Aerare la coltura usando una pipetta pulita (per forzare l’aria nel terreno di coltura)
* Osservando la piastra Petri (con una carta scura sotto la piastra Petri) sotto uno stereoscopio, è possibile vedere i vermi
Requisiti/Materiale
- Specimen (vermi dell’anguilla)
- Microscopio composto
- Contagocce
- Vetro per microscopio
Procedura
- Usando un contagocce, provare a raccogliere alcuni vermi sul fondo della capsula Petri (nella coltura liquida)
- Porre circa 2 gocce del liquido su diversi vetrini di vetro
- Montare il vetrino sul palcoscenico del microscopio (usando i passi menzionati sopra) e osservare prima con basso ingrandimento prima di passare ad un ingrandimento maggiore
Osservazione
Se è presente un verme, noterete che ha un’epidermide trasparente. Rispetto al corpo del verme piatto, l’anguilla sarà cilindrica (a forma di tubo) con una parte posteriore appuntita. Un ingrandimento maggiore può rivelare una parte della bocca nella parte anteriore e un intestino che corre dal bulbo esofageo verso la parte posteriore del corpo.
Conclusione
Ci sono molti tipi di vermi intorno a noi. Alcuni sono parassiti mentre molti altri esistono come organismi a vita libera. Sei quindi incoraggiato a raccogliere diversi tipi di vermi nel tuo ambiente (o anche ordinare altri online) e confrontare le loro caratteristiche anatomiche per determinare come sopravvivono nei loro rispettivi ambienti.
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Flinnsci. (2016). Coltivazione di anguille dell’aceto Guida alla cura del materiale vivo.
Gilbert A. Castro. (1994). Capitolo 86Helminths: Struttura, classificazione, crescita e sviluppo.
William T. Crow. (2012). Lombrico: Entomologia e Nematologia.
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