Cellule di lievito al microscopio: caratteristiche, habitat e osservazione

Che cos’è il lievito?

Le cellule di lievito sono membri del regno dei funghi. Sono microrganismi unicellulari (eucarioti) classificati sotto i phyla Ascomycota (funghi del sacco) e Basidiomyota (funghi superiori), entrambi i quali rientrano nel sottogenere Dikarya.

Cellule di lievito

• Kingdom – Fungus
• Subkingdom – Kikarya
• Phyla – Ascomycota andBasidiomycota

* Lievito in erba, anche chiamati lieviti veri, rientrano nel Phylum Acomycota e nell’Ordine Saccharomycetales

I lieviti sono molto diversi (oltre 1.500 specie) e la maggior parte forma il phylum Ascomycota mentre solo pochi sono classificati come Basidiomycota. Le cellule di lievito si riproducono attraverso la gemmazione o la fissione binaria che sono entrambi metodi di riproduzione asessuata (Horst, 2010).

La gemmazione – Una nuova cellula di lievito si forma attraverso la divisione cellulare mitotica e rimane attaccata come una gemma sulla vecchia cellula fino a quando si divide e diventa indipendente.Qui, la cellula madre produce una escrescenza che alla fine si divide per diventare una cellula indipendente identica alla cellula madre.

Fissione binaria – Nella fissione binaria, non si forma alcuna escrescenza (gemma). Piuttosto, attraverso la mitosi, il genoma si replica e si divide seguito dalla formazione di una nuova membrana plasmatica e infine la cellula si divide in due per formare due nuove cellule dalla cellula madre.

* Alcuni dei funghi definiti dimorfici tendono ad alternare la fase di lievito a quella di ifo, il che significa che possono anche crescere come ife (filiformi)

Habitat

Perché sono molto diversi, il lievito può essere trovato in una grande varietà di habitat, in particolare in ambienti ricchi di zucchero. È probabile che si trovino su fiori, foglie di piante e frutti, così come sul suolo, negli ambienti marini profondi, sulla superficie della pelle e persino nei tratti intestinali degli animali (a sangue caldo).

Mentre si possono trovare in molti ambienti, i lieviti richiedono ambienti umidi con quantità sufficienti di nutrienti semplici e solubili per sostenere la crescita e la moltiplicazione (Horst, 2010).

Mentre tali lieviti come la Candica possono causare infezioni (candidosi) ci sono lieviti utili come:

• Lievito del fornaio
• Lievito nutrizionale
• Lievito del birraio
• Lievito del distillatore e del vino

Lievito al microscopio

Requisiti

• Acqua
• Torta di lievito
• Dropper
• Vetri di vetro e vetrini coprioggetto
• Stains (indicati sotto)

La torta di lievito contiene Saccharomyces Cerevisiae (fungo divoratore di zucchero) e può quindi essere(fungo mangiatore di zucchero) e può quindi essere utilizzato per ottenere il lievito da osservare al microscopio. La seguente è una procedura che può essere utilizzata per preparare il campione per l’osservazione.

• Ottieni il panetto di lievito (questo può essere acquistato nei negozi specializzati in prodotti da forno o in un supermercato)
• Taglia un piccolo pezzo di panetto di lievito e mescolalo con acqua per formare una consistenza pastosa
• Aggiungi un altro po’ di acqua per formare una soluzione
• Utilizzando un contagocce, raccogliere e mettere una goccia della soluzione su un vetrino da microscopio
• Posizionare un coprioggetto da microscopio e osservare sotto l’obiettivo ad alta potenza

Con la microscopia in campo chiaro

Quando si osserva il campione ad alto ingrandimento (1000x e oltre) si vedrà un organismo ovale (a forma di uovo), che è il lievito. È anche possibile osservare le gemme, che possono essere viste su alcune delle cellule di lievito.

Se la soluzione aveva dello zucchero, si noteranno alcune bolle nel campione, che sono il risultato del processo di fermentazione dei microrganismi.

Con la microscopia a fluorescenza

La microscopia a fluorescenza può essere usata per osservare gli organelli all’interno delle cellule di lievito. Questo è in particolare un ottimo metodo attraverso il quale gli studenti possono arrivare a vedere la distribuzione intracellulare della cellula e identificare i diversi tipi di organelli cellulari.

Questo può rivelarsi un po’ impegnativo quando si tratta di lievito, dato che sono di dimensioni molto piccole (rispetto ad altre cellule) e hanno una parete cellulare (Chalfie e Kain, 2005).

Per le cellule di lievito vive, devono essere usati diversi coloranti per aumentare il contrasto ed essere in grado di differenziare i diversi organelli nelle cellule.

Questi includono:

• DAPI per i nuclei
• FM4-64 per i vacuoli
• DIOC6 per l’endoplasmicreticolo e i mitocondri
• DASPMI per i mitocondri
• Calcofluor White che aiuta a colorare la parete cellulare

I lieviti sono tra le più piccole cellule eucariotiche con un diametro tra 5 e 10um. Per questo motivo, è importante vederli ad alto ingrandimento usando la microscopia a fluorescenza.

Qui, obiettivi 60x o 100x con apertura numerica di 1.4 sono raccomandati per l’osservazione visiva e la massima luminosità e risoluzione rispettivamente.

Se si registra usando una fotocamera digitale (per esempio usando una fotocamera 6.8 x 6.8 um sq pixel) allora si raccomanda un ingrandimento di 60x con apertura numerica di 1.4 (Hašek, 2006).

Vedi anche:

Micologia in generale come campo di studio

Funghi – Tipi, morfologia e struttura, usi e svantaggi

Dare un’ulteriore occhiata alla muffa al microscopio.

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