Enzimaktivitás-vizsgálat

A biológiai folyamatok katalizálásának túlnyomó többségét enzimek végzik, amelyek az élő szervezetekben a legkülönbözőbb funkciókat látják el. Elengedhetetlenek az anyagcsere-folyamatokhoz, a sejtek jelátviteléhez és szabályozásához, valamint képesek a molekulák mozgását és aktív szállítását előidézni. Az enzimatikus reakciók specifikusan alakítják át a szubsztrátmolekulákat kémiailag módosított termékekké. Ezek a módosítások magukban foglalják a proteolitikus vagy glikolitikus lebontást, az olyan kémiai módosításokat, mint a foszforilálás, acilálás, glikozilálás vagy oxidatív és reduktív folyamatok. A szabályozatlan enzimaktivitás betegségekhez vezethet. Ennek eredményeképpen az enzimeket a gyógyszeres terápia farmakológiai beavatkozásának vonzó célpontjainak tekintik.

Az aktív enzimek és szubsztrátjaik tervezése és előállítása terén szerzett több évtizedes tapasztalatunk támogatja a biokémiai tesztek egyre bővülő portfóliójának kifejlesztését. Az enzimatikus próbákkal kapcsolatos szolgáltatásainkkal segítjük az enzim- és fehérjekutatásra összpontosító tudósokat:

• az enzimaktivitás és gátlás kinetikai értékelése.
• Inhibitorok szűrése és validálása.
• A gyógyszervegyületek IC50 meghatározása.
• A hatásmódot elemző enzim-inhibitor vizsgálatok
• Az enzimgátlás reverzibilitásának vizsgálata
• Az enzimek szelektivitását elemző szubsztrátprofilozás

Enzimaktivitás-vizsgálataink során először az érdeklődésre számot tartó fehérje immunkapszulázását, majd a szubsztrát- vagy termékforgalom mérését végezzük. Ezek kizárólag olyan monoklonális antitesteket alkalmaznak, amelyeket az enzim aktív formában és olyan komplexekben történő izolálására szűrtek ki, amelyek valószínűleg az in situ asszociációikat képviselik. Ennek számos előnye van. Az enzimet elkülönítik más olyan fehérjéktől, amelyek ugyanazokat a szubsztrátokat vagy termékeket használják vagy termelik, amelyeket szűrnek, és ez lehetővé teszi az egyszerű vizsgálatokat, például az ATP, NADH, piruvát stb. hasznosítását, amelyek in vivo többszörös reakcióknak vannak kitéve. A legtöbb olyan enzimhez, amelyekhez aktivitásvizsgálati készleteink vannak, szendvics ELISA mennyiségi vizsgálatokat is biztosítunk. A kettő kombinálásával specifikus aktivitási adatok nyerhetők. Továbbá, mivel az enzim elkülönül más sejtkomponensektől, a vizsgálat időpontjában benne lévő poszttranszlációs módosítások (PTM) mérhetők pl. utólagos tömegspektrometriával vagy PTM-specifikus antitestekkel való reakcióval.