Élesztősejtek mikroszkóp alatt – Jellemzők, élőhely, megfigyelés

Mi az élesztő?

Az élesztősejtek a gombák birodalmának tagjai. Egysejtű mikroorganizmusok (eukarióta), amelyeket az Ascomycota (zsákgombák) és a Basidiomyota (magasabb rendű gombák) törzsekbe sorolnak, amelyek mindkettő a Dikária albirodalomba tartozik.

Élesztősejtek

• Kingdom – Gombák
• Subkingdom – Kikarya
• Phyla – Ascomycota ésBasidiomycota

* Rügyező élesztő, más néven valódi élesztőkaz Acomycota törzsbe és a Saccharomycetales rendbe

Az élesztők nagyon változatosak (több mint 1500 faj), a legtöbbjük az Ascomycota törzset alkotja, míg csak néhányat sorolnak aBasidiomycota közé. Az élesztősejtek rügyfakadással vagy bináris osztódással szaporodnak, amelyek mindkettő az ivartalan szaporodás módszerei (Horst, 2010).

Budding – Az új élesztősejt mitotikus sejtosztódás révén jön létre, és rügyként marad a régi sejthez kapcsolódva, amíg el nem osztódik és önállóvá nem válik.Itt az anyasejtből kinövés keletkezik, amely végül osztódik, és az anyasejttel azonos, független sejtté válik.

Bináris hasadás – A bináris hasadás során nem alakul ki kinövés (rügy). Inkább a mitózis révén a genom replikálódik és osztódik, amit egy új plazmamembrán kialakulása és végül a sejt kettéosztódása követ, hogy az anyasejtből két új sejt alakuljon ki.

* A dimorfnak nevezett gombák némelyike hajlamos váltakozni az élesztő és a hifa fázis között, ami azt jelenti, hogy hifaként (fonalszerű) is növekedhetnek

Élőhely

Mivel nagyon változatosak, az élesztők sokféle élőhelyen megtalálhatóak, különösen a cukorban gazdag anyagokat tartalmazó környezetben. Valószínűleg megtalálhatók virágokon, növényi leveleken és gyümölcsökön, valamint talajon, mélytengeri környezetben, bőrfelszínen és még állatok (melegvérűek) bélrendszerében is.

Míg sokféle környezetben megtalálhatók, az élesztők nedves környezetet igényelnek, ahol elegendő mennyiségű egyszerű és oldható tápanyag van a növekedés és a szaporodás támogatásához (Horst, 2010).

Míg az olyan élesztőgombák, mint a Candica fertőzéseket okozhatnak (Candidiasis), vannak hasznos élesztőgombák, mint például:

• Pékélesztő
• Táplálékélesztő
• Sörélesztő
• Pálinka- és borélesztő

Élesztő a mikroszkóp alatt

Követelmények

.

• Víz
• Élesztőpogácsa
• Cseppentő
• Olasz tárgylemezek és fedőlemezek
• Színezékek (alább feltüntetve)

Az élesztőpogácsa Saccharomyces Cerevisiae-t tartalmaz(cukor-evő gombát), és ezért felhasználható a mikroszkóp alatt megfigyelhető élesztőgombák kinyerésére. Az alábbiakban egy olyan eljárást mutatunk be, amellyel előkészíthetjük a mintát a megfigyeléshez.

• Készítsen élesztőpogácsát (ezt pékségi szaküzletekben vagy szupermarketben lehet vásárolni)
• Vágjon egy kis darabot az élesztőpogácsából, és keverje össze vízzel, hogy pépes állagú legyen
• Adjon hozzá még egy kis vizet, hogy oldatot képezzen
• Cseppentő segítségével, gyűjtse össze és helyezzen egy cseppet az oldatból egy mikroszkópos tárgylemezre
• Tegyen egy mikroszkópos fedőlemezt, és nagy teljesítményű objektívvel

Fénymikroszkópiával

A mintát nagy nagyítással (1000x és nagyobb) vizsgálva ovális (tojás alakú) organizmusokat fog látni, amelyek az élesztő. Megfigyelhetők a rügyek is, amelyek az élesztősejtek egy részén láthatók.

Ha az oldatban volt némi cukor, akkor a mintában buborékokat is észre lehet venni, amelyek a mikroorganizmusok erjedési folyamatának eredményeként keletkeznek.

Fluoreszcens mikroszkópiával

A fluoreszcens mikroszkópia használható az élesztősejtek belsejében lévő organellumok megfigyelésére. Ez különösenegy nagyszerű módszer, amelynek segítségével a diákok megtekinthetik a sejtek sejten belüli eloszlását és azonosíthatják a különböző típusú sejtorganellákat.

Az élesztő esetében ez egy kis kihívásnak bizonyulhat, mivel (más sejtekhez képest) nagyon kis méretűek és sejtfallal rendelkeznek(Chalfie és Kain, 2005).

Az élő élesztősejtek esetében többféle festéket kell használni a kontraszt növelése és a sejtekben lévő különböző organellumok megkülönböztetése érdekében.

Ezek közé tartoznak:

• DAPI a sejtmagokhoz
• FM4-
• FM4-64 a vakuolumokhoz
• DIOC6 az endoplazmatikus retikulumhoz és a mitokondriumhoz
• DASPMI a mitokondriumhoz
• Calcofluor White, amely segít a sejtfal festésében

A gomba a legkisebb eukarióta sejtek közé tartozik,5 és 10um közötti átmérővel. Ezért fontos, hogy nagy nagyításban, fluoreszcens mikroszkópiával vizsgáljuk őket.

Ezekben az 1,4-es numerikus apertúrájú 60x vagy 100x objektív ajánlott a vizuális megfigyeléshez és a maximális fényerőhöz, illetve felbontáshoz.

Ha digitális kamerával (pl. egy 6,8 x 6,8 um négyzetpixeles kamerával) készítünk felvételt, akkor 60x nagyítás ajánlott, 1-es numerikus apertúrával.4 (Hašek, 2006).

Lásd még:

A gombászat mint tudományterület általában

Gombák – típusok, morfológia és szerkezet, felhasználás és hátrányok

Mélyebb pillantást vetünk a penészre a mikroszkóp alatt.

Return from Yeast Under the Microscope to Microscope Experiments

Return to MicroscopeMaster Home