Test d’activité enzymatique

La grande majorité de la catalyse des processus biologiques est réalisée par des enzymes qui assurent une grande variété de fonctions à l’intérieur des organismes vivants. Elles sont indispensables aux processus métaboliques, à la signalisation et à la régulation cellulaire et peuvent générer le mouvement et le transport actif des molécules. Les réactions enzymatiques convertissent spécifiquement les molécules de substrat en produits chimiquement modifiés. Ces modifications comprennent la dégradation protéolytique ou glycolytique, les modifications chimiques telles que la phosphorylation, l’acylation, la glycosylation ou les processus oxydatifs et réducteurs. Une activité enzymatique dérégulée peut conduire à des états pathologiques. Par conséquent, les enzymes sont considérées comme des cibles attrayantes pour l’intervention pharmacologique dans la thérapie médicamenteuse.

Nos décennies d’expérience dans la conception et la fabrication d’enzymes actives et de leurs substrats soutiennent le développement d’un portefeuille toujours plus large de tests biochimiques. Nous fournissons des services sur les dosages enzymatiques pour aider les scientifiques axés sur la recherche sur les enzymes et les protéines :

• Évaluation cinétique de l’activité et de l’inhibition des enzymes.
• Criblage et validation des inhibiteurs.
• Détermination de la CI50 des composés médicamenteux.
• Etudes sur les inhibiteurs d’enzymes analysant le mode d’action
• Investigations sur la réversibilité de l’inhibition des enzymes
• Profilage des substrats analysant la sélectivité des enzymes

Nos essais d’activité enzymatique impliquent d’abord l’immunocapture de la protéine d’intérêt suivie de la mesure du renouvellement du substrat ou du produit. Ils n’emploient que des anticorps monoclonaux qui ont été criblés pour isoler l’enzyme sous forme active et dans des complexes qui représentent probablement leurs associations in situ. Les avantages sont nombreux. L’enzyme est séparée des autres protéines qui utilisent ou produisent les mêmes substrats ou produits criblés, ce qui permet de réaliser des tests simples comme l’utilisation de l’ATP, du NADH, du pyruvate, etc. qui font l’objet de multiples réactions in vivo. Pour la plupart des enzymes pour lesquelles nous disposons de kits de dosage d’activité, nous fournissons également des tests ELISA Sandwich de quantité. En combinant les deux, il est possible de générer des données d’activité spécifiques. En outre, comme l’enzyme est séparée des autres composants cellulaires, les modifications post-traductionnelles (PTM) qu’elle contient au moment du dosage peuvent être mesurées, par exemple par spectrométrie de masse ultérieure ou par réaction à des anticorps spécifiques des PTM.