PMC

LETTER

Työvoimakustannusten vähentämistarpeen vuoksi monet laboratoriot korvaavat perinteisen syfilistestauksen algoritmin – seulonta manuaalisella ei-treponemal-testillä, jota seuraa anti-Treponema pallidum -vasta-ainetesti – ”käänteisellä” algoritmilla, jossa käytetään automatisoitua immunomääritystestiä T-vasta-aineen osoittamiseen. pallidum IgG-vasta-aineet. Tämän jälkeen IgG-reaktiivisille näytteille tehdään nopea plasmareagiinin (RPR) titterimääritys, jotta i) voidaan todentaa kuppa vaihtoehtoisella menetelmällä ja ii) saada titteri potilaan hoitoa varten. Lisäksi jotkin laboratoriot tekevät perinteisen treponemimäärityksen (fluoresoiva treponemivasta-aineabsorbointi tai T. pallidum -hiukkasagglutinaatiomääritys) näytteille, joiden IgG-seulontamääritys on positiivinen. Useat tutkimukset ovat osoittaneet, että T. pallidum IgG:n vastaisten immunomääritysten herkkyys ja spesifisyys ovat vertailukelpoisia muiden treponemal-määritysten ja muiden kuin treponemal-määritysten herkkyyteen ja spesifisyyteen (1, 3, 4). Kuten muutkin erittäin herkät seulontatestit, anti-T. pallidum IgG -immunomääritykset voivat tuottaa vääriä positiivisia tuloksia, ja niiden positiivinen ennustearvo on alhaisempi matalan esiintyvyyden väestöissä (2). Yen-Lieberman ja muut raportoivat hiljattain, että Bioplex 2200 syphilis IgG multiplex flow immunoassay -testin (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) signaalin voimakkuutta (vasta-aineindeksi ) voidaan käyttää tunnistamaan todennäköisiä vääriä positiivisia tuloksia ja siten vähentämään varmistustestien tarvetta (5). He osoittivat, että näytteet, joiden Bioplexin AI oli ≥6,0, olivat aina positiivisia, kun ne testattiin täydentävällä entsyymi-immunomäärityksellä (EIA), ja sen vuoksi he ehdottivat algoritmia, jossa vain näytteille, joiden Bioplexin syfiliksen IgG:n AI oli <6, tehdään varmistava EIA. Heidän tutkimuksensa tehtiin näytteistä, jotka olivat peräisin matalan esiintyvyyden väestöstä, mutta siinä ei kuvattu väestön erityispiirteitä. Varmistaaksemme edelleen kvantitatiivisten Bioplex syphilis IgG -tietojen käytön tehokkuuden arvioimme kolmen eri potilaskohortin AI-tuloksia (vangitut henkilöt, synnytys- ja naistentautien klinikoilla käyvät naiset ja synnyttäjät) niiden kyvyn ennustaa TP-PA-tuloksia. Tiedot ositettiin RPR-testituloksen mukaan. University of Texas Medical Branch (UTMB) Institutional Review Board hyväksyi tämän tutkimuksen.

Toteutimme retrospektiivisen katsauksen testituloksiin ja potilastietoihin UTMB:n laboratoriotietojärjestelmästä seeruminäytteistä, jotka toimitettiin rutiininomaiseen syfilistestaukseen joulukuussa 2010 ja tammikuussa 2011. Yhteensä 1 849, 3 512 ja 873 näytettä liittyivät vangittuihin henkilöihin, UTMB:n klinikoilla synnytystä edeltävässä tai gynekologisessa hoidossa käyviin naisiin ja vastaavasti synnyttäviin naisiin. Vangittujen henkilöiden joukossa yli 96 prosenttia näytteistä oli peräisin miehiltä. Näytteet jakautuivat rodun tai etnisen alkuperän mukaan seuraavasti: Latinalaisamerikkalaiset 49,4 %, afroamerikkalaiset 27 %, valkoiset/ei-latinalaisamerikkalaiset 21,4 % ja muut/tuntemattomat 2,2 %. Synnytys- ja naistentautipotilaiden näytteiden jakautuminen rodun tai etnisen alkuperän mukaan oli seuraava: Latinalaisamerikkalaiset, 63,1 %; valkoihoiset/ei-ispanjalaiset, 21,8 %; afroamerikkalaiset, 12,6 %; ja muut/tuntemattomat, 2,5 %. UTMB:n sairaalassa synnyttäneistä naisista näytteet jakautuivat rodun tai etnisen alkuperän mukaan seuraavasti:

Bioplex 2200 syphilis IgG, RPR (Sure-Vue; Biokit USA, Inc., Lexington, MA) ja TP-PA (Fujirebio, Inc., Tokio, Japani) -määritykset tehtiin valmistajien ohjeiden mukaisesti. Yhdysvaltain elintarvike- ja lääkevirasto (FDA) on hyväksynyt Bioplex 2200 syfilis IgG -määrityksen käytettäväksi kvalitatiivisena määrityksenä. Aluksi näytteet, joiden tulokset olivat epäselviä (AI = 0,9-1,0) tai reaktiivisia (AI ≥ 1,1) Bioplex-testillä, testattiin ainoastaan semikvantitatiivisella RPR-testillä. Tapauksissa, joissa RPR-testi ei ollut reaktiivinen, tehtiin TP-PA-määritys. Joulukuun 2010 puolivälistä alkaen kaikki näytteet, jotka olivat Bioplex-testillä epäselviä tai reaktiivisia, testattiin sekä semikvantitatiivisella RPR- että TP-PA-määrityksellä. Bioplexin herkkyys ja spesifisyys, jotka perustuivat joko 6:n tai 8:n AI-raja-arvoon, laskettiin käyttämällä 2-2-kontingenssitaulukoita. TP-PA-määritystä pidettiin vertailumenetelmänä. Vastaanottajan toimintaominaisuuksien (ROC) analyysi suoritettiin käyttämällä www-pohjaista laskuria, joka on saatavilla osoitteessa http://www.rad.jhmi.edu/jeng/javarad/roc/JROCFITi.html (viitattu 5. heinäkuuta 2011).

Bioplex-määrityksellä määritetyt T. pallidum IgG-vasta-ainereaktiivisuusprosentit olivat vangittujen, synnytyslääkäreiden ja synnyttäjien ja synnyttäjien kohorttien osalta vastaavasti 7,5 %, 1,6 % ja 2,6 % (tietoja ei ole esitetty). Bioplex IgG -määrityksen AI-arvon kyky ennustaa reaktiivista TP-PA-tulosta vaihteli potilaskohortin ja siihen liittyvän RPR-titterin mukaan (taulukko 1). Kuten Yen-Lieberman ym. raportoivat (5), näytteet, joilla oli reaktiivinen RPR-tiitteri, osoittivat todennäköisemmin myös reaktiivisia TP-PA-tuloksia. Arvioimme kuitenkin näytteet, joiden RPR-titteri oli 1:1, erikseen näytteistä, joiden titteri oli ≥2, koska kliiniset ja epidemiologiset todisteet osoittavat, että RPR-titteri 1:1 ei aina riitä vahvistamaan reaktiivista IgG-tulosta. Tietomme osoittavatkin, että IgG-reaktiiviset näytteet, joiden RPR-tiitterit ovat ≥2, vahvistetaan todennäköisemmin TP-PA-määrityksellä. Synnytys- ja naistentautien ja synnytysten kohorteissa ei ollut TP-PA:n reagoimattomia tuloksia, kun RPR-tiitteri oli ≥2. Vangittujen ja synnytys- ja naistentautien kohorteissa AI-raja-arvo 8 tarjosi suuremman spesifisyyden kuin raja-arvo 6. Yen-Lieberman ym. osoittivat, että AI-arvo 6 tarjosi 100 prosentin spesifisyyden heidän tutkimuspopulaatiossaan (5). Tutkimuksessamme Bioplex IgG -määrityksen spesifisyys ei saavuttanut 100 prosentin raja-arvoa vangittujen kohortissa edes raja-arvolla 8 niiden näytteiden osalta, joiden RPR-tulokset eivät reagoineet tai joiden titteri oli 1:1 (jota pidetään usein epäselvänä titterinä). Tämä kohortti on suuressa syfilisriskissä, ja IgG-reaktiivisuusaste on 7,5 %. Vangittujen henkilöiden näytteistä 85,2 % (98/115) IgG-reaktiivisista näytteistä vahvistettiin TP-PA-määrityksellä (tietoja ei ole esitetty). Vertailun vuoksi todettakoon, että synnytys- ja naistentautien kohortin IgG-reaktiivisuusaste oli 1,6 %; 63,0 % (29/46) tuloksista vahvistettiin TP-PA-määrityksellä. ROC-analyysillä arvioitiin Bioplex syphilis IgG AI -raja-arvojen vaikutusta määritysten herkkyyteen ja spesifisyyteen. ROC-analyysi osoitti, että syfiliksen IgG-määrityksen spesifisyys TP-PA:n vahvistamien näytteiden tunnistamisessa laski yleensä nopeasti, kun AI-arvot olivat alle 8.

Johtopäätöksenä osoitamme ensimmäistä kertaa kvantitatiivisten Bioplex-syfiliksen IgG-tietojen käyttökelpoisuuden erilaisissa potilasryhmissä ja raja-arvon käyttökelpoisuuden sellaisten näytteiden tunnistamisessa, jotka eivät välttämättä vaadi ylimääräistä treponemal-määritystä varmistusta varten. AI-kynnysarvo 8 oli tarpeen maksimaalisen spesifisyyden saavuttamiseksi vangittujen ja synnytys- ja naistentautien kohorteissamme. RPR-tiitterit ≥2 riittävät viittaamaan siihen, että reaktiivinen Bioplex IgG -tulos sekä matalan että korkean riskin kohorteissa edustaa tarkkaa T. pallidum -altistuksen määritystä. Laboratorioiden, jotka päättävät käyttää AI-arvoa osana kuppa-IgG-testiään, on riippumattomasti tarkistettava tämän valmistajan suosittelemaan menettelyyn tehdyn muutoksen suorituskykyominaisuudet. Tämä on tärkeää myös siksi, että kuten olemme osoittaneet, optimaalinen AI-raja-arvo voi vaihdella potilaspopulaatiosta riippuen.

(Nämä tiedot esiteltiin osittain American Society for Microbiologyn vuosikokouksessa New Orleansissa, LA:ssa toukokuussa 2011.)