Hiivasolut mikroskoopin alla-ominaisuudet, elinympäristö, havainnointi

Mikä on hiiva?

Hiivasolut kuuluvat sienikuntaan. Ne ovatyksisoluisia mikro-organismeja (eukaryoottisia), jotka luokitellaan fylleihin Ascomycota(sienet) ja Basidiomyota (korkeammat sienet), jotka molemmat kuuluvat alaryhmään Dikarya.

Hiivasolut

• Kingdom – Fungus
• Subkingdom – Kikarya
• Phyla – Ascomycota jaBasidiomycota

* Nuppuuntuva hiiva, joita kutsutaan myös oikeiksi hiivoiksi, kuuluvat heimoon Acomycota ja järjestykseen Saccharomycetales

Hiivat ovat hyvin monimuotoisia (yli 1500 lajia), ja suurin osa niistä kuuluu heimoon Ascomycota, kun taas vain muutama laji luokitellaan Basidiomycotaan. Hiivasolut lisääntyvät nuppuuntumalla tai binäärisellä jakautumisella, jotka molemmat ovat suvuttoman lisääntymisen menetelmiä (Horst, 2010).

Nuppuuntuminen – Uusi hiivasolu muodostuu mitoottisen solunjakautumisen kautta ja pysyy kiinni nuppuna vanhassa solussa, kunnes se jakautuu ja itsenäistyy.Tällöin kantasolu tuottaa jälkikasvun, joka lopulta jakautuu itsenäiseksi identtiseksi soluksi kuin kantasolu.

Binäärinen jakautuminen – Binäärisessä jakautumisessa ei muodostu jälkikasvua (silmua). Pikemminkin mitoosin avulla genomi monistuu ja jakautuu, minkä jälkeen muodostuu uusi plasmakalvo ja lopulta solu jakautuu kahtia muodostaen emosolusta kaksi uutta solua.

* Joillakin dimorfisiksi kutsutuilla sienillä on taipumus vuorotella hiiva- ja hyfavaiheen välillä, mikä tarkoittaa, että ne voivat kasvaa myös hyfoina (säikeinä)

Elinympäristö

Koska ne ovat hyvin monimuotoisia, hiivoja voi löytyä monista erilaisista elinympäristöistä, erityisesti ympäristöistä, joissa on runsaasti sokeria. Niitä löytyy todennäköisesti kukista, kasvien lehdistä ja hedelmistä sekä maaperästä, syvänmeren ympäristöistä, ihon pinnalta ja jopa eläinten (lämminveristen) suolistorakenteista.

Vaikka niitä löytyy monista ympäristöistä, hiivat vaativat kosteaa ympäristöä, jossa on riittävästi yksinkertaisia ja liukoisia ravinteita kasvun ja lisääntymisen tukemiseksi (Horst, 2010).

Vaikka sellaiset hiivat kuin Candica voivat aiheuttaainfektioita (kandidiaasi), on olemassa hyödyllisiä hiivoja kuten:

• Leipomohiiva
• Ravintohiiva
• Panimohiiva
• Tislaaja- ja viinihiiva

Hiiva mikroskoopin alla

Tarpeet

• Vesi
• Hiivakakku
• Pisaroitin
• Lasiset objektilasit ja peitinlasit
• Peitinlasit (ilmoitettu alla)

Hiivakakku sisältää Saccharomyces Cerevisiae(sokeri-syövää sientä) ja siksi sitä voidaan käyttää hiivan saamiseksi tarkkailtavaksi mikroskoopin alla. Seuraavassa esitetään menettely, jota voidaan käyttää näytteen valmistelemiseksi havainnointia varten.

• Hiivakakun hankkiminen (tätä voi ostaa leipomoiden erikoisliikkeistä tai supermarketista)
• Leikataan pieni pala hiivakakkua ja sekoitetaan veden kanssa tahnamaiseksi
• Lisätään hieman lisää vettä liuoksen muodostamiseksi
• Tipalla, kerää ja aseta pisara liuosta mikroskooppilasille
• Aseta mikroskoopin peitinlippa ja tarkkaile suuritehoisella objektiivilla

Kirkkaakenttämikroskoopilla

Katsottaessa näytettä suurella suurennoksella (1000x ja enemmän) näkee soikeita (munanmuotoisia) organismeja, jotka ovat hiivaa. On myös mahdollista havaita nuppuja, jotka näkyvät joissakin hiivasoluissa.

Jos liuoksessa oli jonkin verran sokeria, näytteessä havaitaan myös kuplia, jotka ovat seurausta mikro-organismien käymisprosessista.

Fluoresenssimikroskopialla

Fluoresenssimikroskopialla voidaan tarkkailla hiivasolujen sisällä olevia organelleja. Tämä on erityisenhyvä menetelmä, jonka avulla opiskelijat pääsevät tarkastelemaan solunsisäistä jakautumista ja tunnistamaan erityyppisiä solun organelleja.

Tämä voi osoittautua hiivan kohdalla hieman haastavaksi, koska ne ovat kooltaan hyvin pieniä (verrattuna muihin soluihin) ja niillä on soluseinämä(Chalfie ja Kain, 2005).

Eläviin hiivasoluihin on käytettävä useita väriaineita kontrastin lisäämiseksi ja solun eri organellien erottamiseksi toisistaan.

Näihin kuuluvat:

• DAPI ytimiä varten
• FM4-64 vakuoleille
• DIOC6 endoplasmicreticulumille ja mitokondrioille
• DASPMI mitokondrioille
• Calcofluor White, joka auttaa värjäämään soluseinää

Mädit kuuluvat pienimpiin eukaryoottisoluihin,joiden halkaisijat vaihtelevat välillä 5 ja 10um. Tästä syystä on tärkeää tarkastella niitä suurella suurennoksella fluoresenssimikroskopiaa käyttäen.

Tässä tapauksessa suositellaan 60x- tai 100x-objektiiveja, joiden numeerinen aukko on 1,4, visuaalisen havainnon ja maksimaalisen kirkkauden ja resoluution aikaansaamiseksi.

Jos kuvaaminen tapahtuu digitaalikameralla (esimerkiksi 6,8 x 6,8 um:n neliöpikselikameralla), suositellaan 60x suurennosta, jonka numeerinen aukko on 1.4 (Hašek, 2006).

Katso myös:

Mykologia yleisesti tutkimusalana

Sienet – tyypit, morfologia ja rakenne, käyttö ja haitat

Katso tarkemmin Homeet mikroskoopin alla.

Paluu hiivasta mikroskoopin alla mikroskooppikokeisiin

Paluu mikroskooppimestarin kotisivulle