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Debido a la necesidad de reducir los costes de mano de obra, muchos laboratorios están sustituyendo el algoritmo tradicional de pruebas de sífilis -examen con una prueba manual no treponémica, seguida de una prueba de anticuerpos anti-Treponema pallidum- por un algoritmo «inverso» que utiliza un inmunoensayo automatizado para el cribado de anticuerpos anti-T. pallidum IgG. A continuación, se realiza una determinación del título de la reagina plasmática rápida (RPR) en las muestras reactivas a la IgG para (i) verificar la sífilis mediante un método alternativo y (ii) obtener un título para el manejo del paciente. Además, algunos laboratorios también realizan un ensayo treponémico tradicional (anticuerpos treponémicos fluorescentes absorbidos o ensayo de aglutinación de partículas de T. pallidum) en las muestras que resultan positivas por un ensayo de detección de IgG. Varios estudios han demostrado que los inmunoensayos IgG anti-T. pallidum tienen sensibilidades y especificidades comparables a las de otros ensayos treponémicos y no treponémicos (1, 3, 4). Al igual que otras pruebas de cribado de alta sensibilidad, los inmunoensayos anti-T. pallidum IgG pueden generar resultados falsos positivos, con un valor predictivo positivo inferior en poblaciones de baja prevalencia (2). Yen-Lieberman et al. informaron recientemente de que la intensidad de la señal (índice de anticuerpos) del inmunoensayo de flujo múltiple de IgG para la sífilis Bioplex 2200 (Bio-Rad Laboratories, Hércules, CA) podía utilizarse para identificar probables resultados falsos positivos y reducir así la necesidad de realizar pruebas de confirmación (5). Demostraron que las muestras con IA Bioplex de ≥6,0 eran siempre positivas cuando se analizaban con un inmunoensayo enzimático (EIA) complementario y, por lo tanto, propusieron un algoritmo en el que sólo las muestras con una IA Bioplex de IgG para la sífilis de <6 se someten a un EIA confirmatorio. Su estudio se realizó en muestras de una población de baja prevalencia, pero no describió las características específicas de la población. Para verificar aún más la eficacia del uso de los datos cuantitativos de Bioplex sobre la sífilis IgG, evaluamos los resultados de la IA de tres cohortes diferentes de pacientes (individuos encarcelados, mujeres que asisten a clínicas de obstetricia y ginecología, y mujeres en el momento del parto) para su capacidad de predecir los resultados de TP-PA. Los datos se estratificaron según el resultado de la prueba RPR. Este estudio fue aprobado por la Junta de Revisión Institucional de la Rama Médica de la Universidad de Texas (UTMB).

Realizamos una revisión retrospectiva de los resultados de las pruebas y los datos de los pacientes del sistema de información del laboratorio de la UTMB para las muestras de suero enviadas para las pruebas de sífilis de rutina durante diciembre de 2010 y enero de 2011. Un total de 1.849, 3.512 y 873 muestras estaban vinculadas a individuos encarcelados, mujeres que asistían a las clínicas de la UTMB para la atención prenatal o ginecológica, y mujeres en el parto, respectivamente. Entre los individuos encarcelados, más del 96% de los especímenes eran de hombres. La distribución de especímenes por raza o etnia individual fue la siguiente: Hispanos, 49,4%; afroamericanos, 27%; blancos/no hispanos, 21,4%; y otros/desconocidos, 2,2%. Entre las pacientes de ginecología y obstetricia, la distribución de muestras por raza o etnia individual fue la siguiente: Hispanos, 63,1%; blancos/no hispanos, 21,8%; afroamericanos, 12,6%; y otros/desconocidos, 2,5%. Entre las mujeres que dieron a luz en el hospital UTMB, la distribución de muestras por raza o etnia individual fue la siguiente: Hispanos, 71,8%; blancos/no hispanos, 15,8%; afroamericanos, 10%; y otros/desconocidos, 2,4%.

Los ensayos Bioplex 2200 syphilis IgG, RPR (Sure-Vue; Biokit USA, Inc., Lexington, MA), y TP-PA (Fujirebio, Inc., Tokio, Japón) se realizaron según las instrucciones de los fabricantes. El ensayo Bioplex 2200 para sífilis IgG ha sido autorizado por la Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos para su uso como ensayo cualitativo. Inicialmente, los especímenes con resultados equívocos (IA = 0,9 a 1,0) o reactivos (IA ≥ 1,1) por Bioplex fueron probados por RPR semicuantitativo solamente. En los casos en los que la prueba RPR fue no reactiva, se realizó un ensayo TP-PA. A partir de mediados de diciembre de 2010, todas las muestras que resultaron equívocas o reactivas con Bioplex se sometieron a las pruebas de RPR semicuantitativo y TP-PA. La sensibilidad y la especificidad de Bioplex, basadas en un valor de corte de IA de 6 u 8, se calcularon utilizando tablas de contingencia de 2 por 2. El ensayo TP-PA se consideró el método de referencia. El análisis de las características operativas del receptor (ROC) se llevó a cabo utilizando la calculadora basada en la web disponible en http://www.rad.jhmi.edu/jeng/javarad/roc/JROCFITi.html (consultado el 5 de julio de 2011).

Las tasas de reactividad de IgG anti-T. pallidum determinadas por el ensayo Bioplex para las cohortes de encarcelados, obstetricia/ginecología y parto fueron del 7,5%, 1,6% y 2,6%, respectivamente (datos no mostrados). La capacidad del valor de IA del ensayo Bioplex IgG para predecir un resultado de TP-PA reactivo varió según la cohorte de pacientes y el título de RPR acompañante (Tabla 1). Como informaron Yen-Lieberman et al. (5), las muestras que presentaban títulos de RPR reactivos eran más propensas a presentar resultados de TP-PA reactivos. Sin embargo, evaluamos los especímenes con un título de RPR de 1:1 por separado de aquellos con títulos de ≥2 debido a la evidencia clínica y epidemiológica que indica que un título de RPR de 1:1 no siempre es suficiente para confirmar un resultado de IgG reactivo. De hecho, nuestros datos muestran que las muestras reactivas a IgG con títulos de RPR de ≥2 tienen más probabilidades de ser confirmadas por el ensayo TP-PA. Entre las cohortes de ginecología y obstetricia, no hubo resultados no reactivos al TP-PA cuando el título de RPR era ≥2. Entre las cohortes de encarcelados y ginecólogos/obstetras, un punto de corte de IA de 8 proporcionó una mayor especificidad que un punto de corte de 6. Yen-Lieberman et al. mostraron que un IA de 6 proporcionó una especificidad del 100% para su población de estudio (5). Incluso con un punto de corte de 8, la especificidad del ensayo Bioplex IgG en nuestro estudio no alcanzó el 100% en la cohorte encarcelada para las muestras con resultados no reactivos al RPR o con un título de 1:1 (a menudo considerado un título equívoco). Esta cohorte tiene un alto riesgo de sífilis, con una tasa de IgG reactiva del 7,5%. Entre las muestras de individuos encarcelados, el 85,2% (98/115) de las muestras reactivas a la IgG fueron confirmadas por el ensayo TP-PA (datos no mostrados). En comparación, la tasa de reactividad de IgG en la cohorte de ginecología y obstetricia fue del 1,6%; el 63,0% (29/46) de los resultados fueron confirmados por el ensayo TP-PA. Para evaluar el efecto de los valores de corte de sífilis IgG AI de Bioplex en la sensibilidad y especificidad de los ensayos, se realizó un análisis ROC. El análisis ROC mostró que la especificidad del ensayo de sífilis IgG para identificar las muestras confirmadas por TP-PA generalmente disminuía rápidamente a valores de IA inferiores a 8.