Enzyme Activity Assay

A grande maioria dos processos biológicos catalisadores é realizada por enzimas que fornecem uma grande variedade de funções dentro dos organismos vivos. Elas são indispensáveis para processos metabólicos, sinalização e regulação celular e podem gerar movimento e transporte ativo de moléculas. Reações enzimáticas convertem especificamente moléculas de substrato em produtos quimicamente modificados. Estas modificações incluem degradação proteolítica ou glicolítica, modificações químicas como a fosforilação, acitilação, glicosilação ou processos oxidativos e redutores. A atividade enzimática desregulada pode levar a estados de doença. Como resultado, as enzimas são consideradas alvos atraentes para intervenção farmacológica na terapia medicamentosa.

As nossas décadas de experiência no desenho e fabricação de enzimas activas e seus substratos apoiam o desenvolvimento de um portfólio sempre em expansão de ensaios bioquímicos. Fornecemos serviços em ensaios enzimáticos para auxiliar os cientistas focados na pesquisa de enzimas e proteínas:

• Avaliação cinética da atividade e inibição de enzimas.
• Triagem e validação de inibidores.
• Determinação de compostos de fármacos pelo métodoIC50.
• Estudos de inibidor enzimático analisando modo de ação
• Investigações sobre reversibilidade da inibição enzimática
• Perfil de substrato analisando seletividade de enzimas

Nossos ensaios de atividade enzimática envolvem a imunocaptação da proteína de interesse primeiro seguida pela medição do substrato ou rotatividade do produto. Estes empregam apenas anticorpos monoclonais que foram testados para isolar a enzima na forma activa e em complexos que provavelmente representam as suas associações in situ. Existem muitas vantagens. A enzima é separada de outras proteínas que utilizam ou produzem os mesmos substratos ou produtos rastreados e isto permite ensaios simples como a utilização de ATP, NADH, piruvato e etc., que estão sujeitos a múltiplas reacções in vivo. Para a maioria das enzimas para as quais temos kits de ensaio de atividade, também fornecemos ensaios de quantidade de ELISA em sanduíche. Ao combinar os dois, é possível gerar dados específicos de atividade. Além disso, como a enzima é separada de outros componentes celulares, as modificações pós-tradução (PTMs) que contém no momento do ensaio podem ser medidas, por exemplo, por espectrometria de massa subsequente ou reação a anticorpos específicos PTM.