PMC

LETTER

På grund af behovet for at reducere arbejdsomkostningerne erstatter mange laboratorier den traditionelle syfilistestningsalgoritme – screening med en manuel ikke-tontreponemal test, efterfulgt af en anti-Treponema pallidum antistof test – med en “omvendt” algoritme, der bruger et automatiseret immunoassay til at screene for anti-T. pallidum IgG-antistoffer. Der foretages derefter en hurtig plasma reagin (RPR) titerbestemmelse på IgG-reaktive prøver for i) at verificere syfilis ved en alternativ metode og ii) at få en titer til brug for patientbehandling. Desuden udfører nogle laboratorier også en traditionel treponemalanalyse (fluorescerende treponemale antistoffer absorberet eller T. pallidum partikelagglutinationsanalyse) på prøver, der er testet positive ved en IgG-screeninganalyse. En række undersøgelser har vist, at anti-T. pallidum IgG-immunoassays har en følsomhed og specificitet, der kan sammenlignes med andre treponemale assays og ikke-tontreponemale assays (1, 3, 4). Som det er tilfældet med andre meget følsomme screeningstest, kan anti-T. pallidum IgG-immunoassays give falsk-positive resultater med en lavere positiv prædiktiv værdi i lavprævalente populationer (2). Yen-Lieberman et al. rapporterede for nylig, at signalstyrken (antistofindeks ) i Bioplex 2200 syfilis IgG multiplex flow immunoassay (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) kan bruges til at identificere sandsynlige falsk-positive resultater og dermed reducere behovet for bekræftende testning (5). De påviste, at prøver med Bioplex AI på ≥6,0 altid var positive, når de blev testet med en supplerende enzymimmunoassay (EIA), og foreslog derfor en algoritme, hvor kun prøver med en Bioplex syfilis IgG AI på <6 underkastes en bekræftende EIA. Deres undersøgelse blev udført på prøver fra en population med lav prævalens, men beskrev ikke specifikke populationskarakteristika. For yderligere at verificere effektiviteten af brugen af de kvantitative Bioplex syfilis IgG-data evaluerede vi AI-resultater fra tre forskellige patientkohorter (fængslede personer, kvinder på obstetriske og gynækologiske klinikker og kvinder under fødsel) med henblik på deres evne til at forudsige TP-PA-resultater. Dataene blev stratificeret efter RPR-testresultat. Denne undersøgelse blev godkendt af University of Texas Medical Branch (UTMB) Institutional Review Board.

Vi foretog en retrospektiv gennemgang af testresultater og patientdata fra UTMB’s laboratorieinformationssystem for serumprøver, der blev indsendt til rutinemæssig syfilistest i december 2010 og januar 2011. I alt 1.849, 3.512 og 873 prøver blev knyttet til henholdsvis fængslede personer, kvinder, der deltog i UTMB-klinikker til prænatal eller gynækologisk behandling, og kvinder under fødsel. Blandt de fængslede personer var over 96 % af prøverne fra mænd. Fordelingen af prøverne efter race eller etnicitet var som følger Hispanic, 49,4 %; afroamerikaner, 27 %; hvid/ikke-hispanic, 21,4 %; og andet/ikke kendt, 2,2 %. Blandt OB/Gyn-patienterne var fordelingen af prøverne efter race eller etnicitet som følger: Hispanic, 63,1 %; hvid/ikke-hispanic, 21,8 %; afroamerikansk, 12,6 %; og andet/ikke kendt, 2,5 %. Blandt kvinder, der fødte på UTMB-hospitalet, var fordelingen af prøverne efter race eller etnicitet følgende: Hispanic, 71,8 %; hvid/ikke-hispanic, 15,8 %; afroamerikansk, 10 %; og andet/ukendt, 2,4 %.

Bioplex 2200 syfilis IgG, RPR (Sure-Vue; Biokit USA, Inc., Lexington, MA) og TP-PA (Fujirebio, Inc., Tokyo, Japan) blev udført i henhold til producenternes instruktioner. Bioplex 2200 syfilis IgG-assayet er godkendt af den amerikanske Food and Drug Administration til brug som et kvalitativt assay. I første omgang blev prøver med resultater, der var tvetydige (AI = 0,9 til 1,0) eller reaktive (AI ≥ 1,1) ved Bioplex, kun testet ved semikvantitativ RPR. I de tilfælde, hvor RPR-testen ikke var reaktiv, blev der foretaget en TP-PA-analyse. Fra midten af december 2010 blev alle prøver, der var tvetydige eller reaktive med Bioplex, testet med både semiquantitativ RPR- og TP-PA-test. Bioplex’ følsomhed og specificitet, baseret på en AI-cutoff-værdi på enten 6 eller 8, blev beregnet ved hjælp af 2-by-2-kontingenstabeller. TP-PA-assayet blev anset for at være referencemetoden. Receiver operating characteristic (ROC)-analyse blev udført ved hjælp af den webbaserede beregner, der er tilgængelig på http://www.rad.jhmi.edu/jeng/javarad/roc/JROCFITi.html (tilgået den 5. juli 2011).

De anti-T. pallidum IgG-reaktive satser bestemt ved Bioplex-assayet for kohorterne med indespærrede, OB/Gyn og fødsler var henholdsvis 7,5 %, 1,6 % og 2,6 % (data ikke vist). Evnen af AI-værdien af Bioplex IgG-assayet til at forudsige et reaktivt TP-PA-resultat varierede fra patientkohorte til patientkohorte og fra den ledsagende RPR-titer til RPR-titer (tabel 1). Som rapporteret af Yen-Lieberman et al. (5) var der større sandsynlighed for, at prøver, der udviste reaktive RPR-titere, udviste reaktive TP-PA-resultater. Vi evaluerede imidlertid prøver med en RPR-titer på 1:1 separat fra prøver med titre på ≥2 på grund af kliniske og epidemiologiske beviser, der indikerer, at en RPR-titer på 1:1 ikke altid er tilstrækkelig til at bekræfte et reaktivt IgG-resultat. Vores data viser faktisk, at IgG-reaktive prøver med RPR-titere på ≥2 er mere tilbøjelige til at blive bekræftet af TP-PA-assayet. Blandt OB/Gyn- og fødselskohorterne var der ingen TP-PA-nonreaktive resultater, når RPR-titeren var ≥2. Blandt kohorterne af indsatte og OB/Gyn-kohorter gav en AI-cutoff på 8 en højere specificitet end en cutoff på 6. Yen-Lieberman et al. viste, at en AI på 6 gav 100 % specificitet for deres undersøgelsespopulation (5). Selv ved en cutoff på 8 nåede specificiteten af Bioplex IgG-assayet i vores undersøgelse ikke op på 100 % i den indespærrede kohorte for prøver med RPR-nonreaktive resultater eller med en titer på 1:1 (ofte betragtet som en titer, der er tvetydig). Denne kohorte er i høj risiko for syfilis med en IgG-reaktiv rate på 7,5 %. Blandt prøverne fra indsatte personer blev 85,2 % (98/115) af de IgG-reaktive prøver bekræftet med TP-PA-assayet (data ikke vist). Til sammenligning var IgG-reaktivitetsraten i OB/Gyn-kohorten 1,6 %; 63,0 % (29/46) af resultaterne blev bekræftet ved TP-PA-assayet. Der blev foretaget en ROC-analyse for at vurdere virkningen af Bioplex-syfilis IgG AI-cutoff-værdierne på sensitiviteten og specificiteten af assaysene. ROC-analysen viste, at specificiteten af syfilis IgG-assayet til identifikation af TP-PA-konfirmerede prøver normalt faldt hurtigt ved AI-værdier på under 8.

Sammenfattende demonstrerer vi for første gang anvendeligheden af kvantitative Bioplex syfilis IgG-data i forskellige patientpopulationer og nytten af en grænseværdi til at identificere prøver, der muligvis ikke kræver en yderligere treponemal analyse til bekræftelse. En AI-cutoffværdi på 8 var nødvendig for at opnå maksimal specificitet i vores kohorter af indespærrede og OB/Gyn-kohorter. RPR-titre på ≥2 er tilstrækkelige til at antyde, at et reaktivt Bioplex IgG-resultat i både lav- og højrisikokohorter repræsenterer en præcis bestemmelse af eksponering for T. pallidum. Endelig skal laboratorier, der vælger at anvende AI-værdien som en del af deres syfilis IgG-test, uafhængigt verificere præstationsegenskaberne ved denne ændring i forhold til producentens anbefalede procedure. Dette er også vigtigt, fordi den optimale AI-cutoff, som vi har vist, kan variere afhængigt af patientpopulationen.

(Disse data blev delvist præsenteret på det årlige møde i American Society for Microbiology i New Orleans, LA, i maj 2011.)