Test aktivity enzymů

Převážnou většinu katalyzujících biologických procesů vykonávají enzymy, které v živých organismech zajišťují širokou škálu funkcí. Jsou nepostradatelné pro metabolické procesy, buněčnou signalizaci a regulaci a mohou vytvářet pohyb a aktivní transport molekul. Enzymatické reakce specificky přeměňují molekuly substrátů na chemicky modifikované produkty. Tyto modifikace zahrnují proteolytickou nebo glykolytickou degradaci, chemické modifikace, jako je fosforylace, acylace, glykosylace nebo oxidační a redukční procesy. Dysregulovaná aktivita enzymů může vést k chorobným stavům. V důsledku toho jsou enzymy považovány za atraktivní cíle pro farmakologické zásahy při léčbě léčivy.

Naše desetiletí zkušeností s návrhem a výrobou aktivních enzymů a jejich substrátů podporují vývoj stále se rozšiřujícího portfolia biochemických testů. Poskytujeme služby v oblasti enzymatických testů, které pomáhají vědcům zaměřeným na výzkum enzymů a proteinů:

• Kinetické hodnocení aktivity a inhibice enzymů.
• Screening a validace inhibitorů.
• Stanovení IC50 sloučenin léčiv.
• Studie enzymových inhibitorů analyzující způsob účinku
• Vyšetřování reverzibility enzymové inhibice
• Substrátové profilování analyzující selektivitu enzymů

Naše testy enzymové aktivity zahrnují nejprve imunokapitulaci proteinu zájmu a následné měření obratu substrátu nebo produktu. Používají se při nich pouze monoklonální protilátky, které byly prověřeny za účelem izolace enzymu v aktivní formě a v komplexech, které pravděpodobně představují jejich asociace in situ. To má mnoho výhod. Enzym je oddělen od ostatních proteinů, které využívají nebo produkují stejné substráty nebo produkty, které jsou předmětem screeningu, a to umožňuje jednoduché testy, jako je využití ATP, NADH, pyruvátu atd., které jsou předmětem mnoha reakcí in vivo. Pro většinu enzymů, pro které máme k dispozici soupravy pro stanovení aktivity, poskytujeme také sendvičové kvantitativní testy ELISA. Kombinací těchto dvou metod je možné získat specifické údaje o aktivitě. Kromě toho, protože je enzym oddělen od ostatních buněčných složek, lze posttranslační modifikace (PTM), které obsahuje v době testu, měřit např. následnou hmotnostní spektrometrií nebo reakcí na protilátky specifické pro PTM.

.