PMC

LETTER

Vzhledem k potřebě snížit náklady na pracovní sílu nahrazuje mnoho laboratoří tradiční algoritmus testování na syfilis – screening pomocí manuálního netreponemového testu, po kterém následuje test na protilátky anti-Treponema pallidum – „obráceným“ algoritmem, který ke screeningu na anti-T používá automatický imunoanalytický test. pallidum IgG protilátek. Na IgG-reaktivních vzorcích se poté provede stanovení titru rychlého plazmatického reaginu (RPR), aby se (i) ověřila syfilis alternativní metodou a (ii) získal titr pro management pacienta. Kromě toho některé laboratoře provádějí také tradiční treponemový test (absorpce fluorescenčních treponemových protilátek nebo test aglutinace částic T. pallidum) na vzorcích, které jsou pozitivní při screeningovém testu IgG. Řada studií prokázala, že imunoanalýza anti-T. pallidum IgG má citlivost a specifičnost srovnatelnou s jinými treponemovými testy a netreponemovými testy (1, 3, 4). Stejně jako u jiných vysoce citlivých screeningových testů mohou imunoanalýzy anti-T. pallidum IgG generovat falešně pozitivní výsledky s nižší pozitivní prediktivní hodnotou v populacích s nízkou prevalencí (2). Yen-Lieberman a kol. nedávno uvedli, že sílu signálu (index protilátek ) multiplexního průtokového imunoanalýzy Bioplex 2200 syphilis IgG (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) lze využít k identifikaci pravděpodobných falešně pozitivních výsledků, a tím snížit potřebu konfirmačního testování (5). Prokázali, že vzorky s AI Bioplex ≥6,0 byly vždy pozitivní, když byly testovány doplňkovou enzymovou imunoanalýzou (EIA), a proto navrhli algoritmus, v němž jsou konfirmační EIA podrobeny pouze vzorky s AI syfilis IgG Bioplex <6 . Jejich studie byla provedena na vzorcích z populace s nízkou prevalencí, ale nepopisovala specifické charakteristiky populace. Abychom dále ověřili účinnost použití kvantitativních údajů Bioplex syfilis IgG, vyhodnotili jsme výsledky AI ze tří různých kohort pacientů (vězněné osoby, ženy navštěvující porodnické a gynekologické kliniky a ženy při porodu) z hlediska jejich schopnosti předpovědět výsledky TP-PA. Data byla stratifikována podle výsledku testu RPR. Tato studie byla schválena Institucionální revizní komisí Texaské lékařské univerzity (University of Texas Medical Branch, UTMB).

Provedli jsme retrospektivní revizi výsledků testů a údajů o pacientech z laboratorního informačního systému UTMB u vzorků séra zaslaných k rutinnímu vyšetření na syfilis během prosince 2010 a ledna 2011. Celkem 1 849, 3 512 a 873 vzorků bylo spojeno s uvězněnými osobami, ženami navštěvujícími kliniky UTMB za účelem prenatální nebo gynekologické péče a ženami při porodu. Mezi uvězněnými osobami pocházelo více než 96 % vzorků od mužů. Rozdělení vzorků podle rasy nebo etnické příslušnosti bylo následující: Hispánci 49,4 %, Afroameričané 27 %, běloši/nehispánci 21,4 % a ostatní/neznámí 2,2 %. Mezi gynekologicko-porodnickými pacientkami bylo rozdělení vzorků podle jednotlivých ras nebo etnických skupin následující: Hispánci 63,1 %, běloši/nehispánci 21,8 %, Afroameričané 12,6 % a ostatní/neznámí 2,5 %. Mezi ženami rodícími v nemocnici UTMB bylo rozdělení vzorků podle jednotlivých ras nebo etnik následující:

Testy Bioplex 2200 na syfilis IgG, RPR (Sure-Vue; Biokit USA, Inc., Lexington, MA) a TP-PA (Fujirebio, Inc., Tokio, Japonsko) byly provedeny podle pokynů výrobců. Test Bioplex 2200 na syfilis IgG byl schválen americkým Úřadem pro kontrolu potravin a léčiv pro použití jako kvalitativní test. Zpočátku byly vzorky s výsledky, které byly nejednoznačné (AI = 0,9 až 1,0) nebo reaktivní (AI ≥ 1,1) pomocí Bioplexu, testovány pouze semikvantitativním RPR. V případech, kdy byl test RPR nereaktivní, byl proveden test TP-PA. Od poloviny prosince 2010 byly všechny vzorky, u kterých byl test Bioplex nejednoznačný nebo reaktivní, testovány jak semikvantitativním RPR, tak TP-PA testem. Citlivost a specifičnost testu Bioplex, založené na hraniční hodnotě AI 6 nebo 8, byly vypočteny pomocí kontingenčních tabulek 2 na 2. Test TP-PA byl považován za referenční metodu. Analýza operačních charakteristik přijímače (ROC) byla provedena pomocí webové kalkulačky dostupné na adrese http://www.rad.jhmi.edu/jeng/javarad/roc/JROCFITi.html (přístup 5. července 2011).

Míra reaktivity anti-T. pallidum IgG stanovená testem Bioplex pro kohorty uvězněných, porodníků a porodnic byla 7,5 %, 1,6 % a 2,6 % (údaje nejsou uvedeny). Schopnost hodnoty AI testu Bioplex IgG předpovědět reaktivní výsledek TP-PA se lišila podle kohorty pacientů a podle doprovodného titru RPR (tabulka 1). Jak uvádí Yen-Lieberman et al. (5), vzorky, které vykazovaly reaktivní titry RPR, vykazovaly s větší pravděpodobností reaktivní výsledky TP-PA. Vzorky s titrem RPR 1:1 jsme však hodnotili odděleně od vzorků s titrem ≥2, protože klinické a epidemiologické důkazy naznačují, že titr RPR 1:1 není vždy dostatečný k potvrzení reaktivního výsledku IgG. Naše údaje skutečně ukazují, že vzorky s reaktivním IgG s titrem RPR ≥2 jsou s větší pravděpodobností potvrzeny testem TP-PA. V kohortách OB/Gyn a porodníků nebyly zaznamenány žádné nereaktivní výsledky TP-PA, pokud byl titr RPR ≥2. Mezi kohortami vězněných a OB/Gyn poskytovala hraniční hodnota AI 8 vyšší specificitu než hraniční hodnota 6. Yen-Lieberman a kol. prokázali, že AI 6 poskytovala u jejich studované populace 100% specificitu (5). Ani při hraniční hodnotě 8 nedosáhla specifita testu Bioplex IgG v naší studii v kohortě uvězněných osob 100 % u vzorků s nereaktivními výsledky RPR nebo s titrem 1:1 (často považovaným za ekvivokální titr). Tato kohorta je vysoce riziková pro syfilis, s mírou reaktivity IgG 7,5 %. Mezi vzorky od uvězněných osob bylo 85,2 % (98/115) IgG-reaktivních vzorků potvrzeno testem TP-PA (údaje nejsou uvedeny). Pro srovnání, míra reaktivity IgG v kohortě OB/Gyn byla 1,6 %; 63,0 % (29/46) výsledků bylo potvrzeno testem TP-PA. Pro posouzení vlivu mezních hodnot Bioplex syphilis IgG AI na citlivost a specifičnost testů byla provedena ROC analýza. Analýza ROC ukázala, že specificita testu syfilis IgG pro identifikaci vzorků potvrzených TP-PA obvykle rychle klesá při hodnotách AI nižších než 8.

Závěrem poprvé demonstrujeme užitečnost kvantitativních údajů Bioplex syphilis IgG u různých populací pacientů a užitečnost mezní hodnoty pro identifikaci vzorků, které nemusí vyžadovat další treponemový test pro potvrzení. Mezní hodnota AI 8 byla nezbytná k dosažení maximální specifičnosti v našich kohortách uvězněných a gynekologicko-porodnických pacientů. Titry RPR ≥ 2 jsou dostatečné k tomu, aby naznačovaly, že reaktivní výsledek Bioplex IgG v kohortách s nízkým i vysokým rizikem představuje přesné stanovení expozice T. pallidum. A konečně, laboratoře, které se rozhodnou použít hodnotu AI jako součást svého testu na syfilis IgG, musí nezávisle ověřit výkonnostní charakteristiky této modifikace doporučeného postupu výrobce. To je důležité také proto, že jak jsme ukázali, optimální mezní hodnota AI se může lišit v závislosti na populaci pacientů.

(Tyto údaje byly částečně prezentovány na výročním zasedání Americké mikrobiologické společnosti v New Orleans, LA, v květnu 2011)

.