Kvasinkové buňky pod mikroskopem – charakteristika, stanoviště, pozorování

Co jsou to kvasinky?

Kvasinkové buňky patří do říše hub. Jsou to jednobuněčné mikroorganismy (eukaryotické) zařazené do fylů Ascomycota(vřeckovýtrusné houby) a Basidiomyota (vyšší houby), které oba spadají do podříše Dikarya.

Kvasinkové buňky

• Říše – Houby
• Podříše – Kikarya
• Fyla – Ascomycota aBasidiomycota

* Pupeny kvasinek, označované také jako pravé kvasinky, spadají pod fyziologii Acomycota a do řádu Saccharomycetales

Kvasinky jsou velmi rozmanité (více než 1500 druhů), přičemž většina z nich tvoří fyziologii Ascomycota, zatímco jen některé jsou zařazeny do řáduBasidiomycota. Kvasinkové buňky se rozmnožují pučením nebo binárním dělením, což jsou oba způsoby nepohlavního rozmnožování (Horst, 2010).

Pučení – Nová kvasinková buňka vzniká mitotickým dělením a zůstávápřipojena jako pupen ke staré buňce, dokud se nerozdělí a neosamostatní.Zde mateřská buňka vytváří výrůstek, který se nakonec rozdělí a stane se nezávislou buňkou totožnou s mateřskou buňkou.

Binární dělení – Při binárním dělení se netvoří žádný výrůstek (pupen). Spíše se prostřednictvím mitózy replikuje a dělí genom, následuje vytvoření nové plazmatické membrány a nakonec se buňka rozdělí na dvě a z mateřské buňky vzniknou dvě nové buňky.

* Některé houby označované jako dimorfní mají tendenci střídat kvasinkovou a hyfovou fázi, což znamená, že mohou růst také jako hyfy (podobné vláknům)

Prostředí

Protože jsou velmi rozmanité, lze kvasinky nalézt v nejrůznějších prostředích, zejména v prostředí s materiály bohatými na cukr. Pravděpodobně se vyskytují na květech, listech rostlin a ovoci, stejně jako na půdě, v hlubokomořském prostředí, na povrchu kůže a dokonce i v trávicím traktu živočichů (teplokrevných).

Ačkoli se mohou vyskytovat v mnoha prostředích, kvasinky vyžadují vlhké prostředí s dostatečným množstvím jednoduchých a rozpustných živin pro podporu růstu a množení (Horst, 2010).

Přestože takové kvasinky jako Candica mohou způsobovatinfekce (kandidózy), existují užitečné kvasinky, jako např:

• Pekařské kvasinky
• Nutriční kvasinky
• Pivovarské kvasinky
• Destilerské a vinné kvasinky

Kvasinky pod mikroskopem

Požadavky

.

• Voda
• Kvasinkový koláč
• Kropítko
• Skleněná sklíčka a krycí sklíčka
• Sestavy (uvedené níže)

Kvasinkový koláč obsahuje Saccharomyces Cerevisiae (cukr-požírající houby), a proto jej lze použít k získání kvasinek k pozorování pod mikroskopem. Níže je uveden postup, který lze použít k přípravěvzorku k pozorování.

• Získejte kvasnicový koláč (lze jej zakoupit ve specializovaných obchodech s pečivem nebo v supermarketu)
• Nakrájejte malý kousek kvasnicového koláče a smíchejte jej s vodou tak, aby vytvořil pastovitou strukturu
• Přidejte ještě trochu vody a vytvořte roztok
• Pomocí kapátka, naberte a umístěte kapku roztoku na mikroskopické sklíčko
• Přiložte krycí sklíčko mikroskopu a pozorujte pod vysoce výkonným objektivem

Mikroskopem s jasným polem

Při prohlížení vzorku při vysokém zvětšení (1000x a více) uvidíte oválný (vejčitý) organismus, což jsou kvasinky. Je také možné pozorovat pupeny, které jsou vidět na některých kvasinkových buňkách.

Pokud bylo v roztoku trochu cukru, lze ve vzorku pozorovat bublinky, které jsou důsledkem kvasného procesu mikroorganismů.

Pomocí fluorescenční mikroskopie

Fluorescenční mikroskopii lze použít pro účely pozorování organel uvnitř kvasinkových buněk. Jedná se zejména o skvělou metodu, pomocí které si studenti mohou prohlédnout vnitrobuněčné rozmístění buněk a identifikovat různé typy buněčných organel.

U kvasinek to může být trochu náročné vzhledem k tomu, že jsou velmi malé (ve srovnání s jinými buňkami) a mají buněčnou stěnu(Chalfie a Kain, 2005).

U živých kvasinkových buněk je třeba použít řadu barviv, aby se zvýšil kontrast a bylo možné rozlišit jednotlivé organely v buňkách.

Mezi ně patří např:

• DAPI pro jádra
• FM4-.64 pro vakuoly
• DIOC6 pro endoplazmatickéretikulum a mitochondrie
• DASPMI pro mitochondrie
• Kalcofluorová běloba, kterápomáhá obarvit buněčnou stěnu

Kvasinky patří mezi nejmenší eukaryotické buňkys průměrem mezi 5 a 10um. Z tohoto důvodu je důležité je prohlížet při velkém zvětšenípomocí fluorescenční mikroskopie.

Pro vizuální pozorování a maximální jas a rozlišení se doporučují objektivy 60x nebo 100x s numerickou clonou 1,4.

Při záznamu pomocí digitální kamery (např. pomocí kamery s rozměry 6,8 x 6,8 um sq pixel) se doporučuje zvětšení 60x s numerickou clonou 1.4 (Hašek, 2006).

Viz také:

Mykologie obecně jako obor studia

Houby – druhy, morfologie a struktura, využití a nevýhody

Další pohled na plísně pod mikroskopem.

Zpět z Kvasinky pod mikroskopem na Pokusy pod mikroskopem

Zpět na úvodní stránku MicroscopeMaster

.