Articles

Červ pod mikroskopem

On 30 září, 2021 by admin

Charles Darwin, považovaný za otce evolučního myšlení, byl žížalami obzvláště fascinován a věnoval čas studiu jejich života a chování. Díky svým studiím byl schopen určit, jak se chovají, jaký druh potravy preferují a také jejich anatomii, kromě mnoha dalších charakteristik. Díky meandrování v zemi (v půdě) a jejich potravním návykům dokázal Darwin také vysvětlit jejich přínos v zemědělství.

* Zajímavost: V počátcích mikroskopie byly spermie některými vědci a filozofy považovány za parazitické červy (označované jako spermatické červy).

Obecný úvod do žížal

Žížaly jsou v podstatě bezobratlí živočichové, kteří se dělí do tří hlavních skupin: ploštěnci, hlístice a článkovaní červi. Ačkoli se liší tvarem a velikostí, červi se vyznačují protáhlým/štíhlým, měkkým tělem, které je oboustranně symetrické. Jsou také beznohé, a proto se pohybují plazením po povrchu pomocí souboru svalů. Některé druhy však mají struktury podobné chlupům, které se podílejí na pohybu.

Vířníci se vyskytují v různých biotopech po celém světě. Zatímco například takové žížaly, jako jsou žížaly, lze nalézt v mnoha vlhkých suchozemských prostředích (v půdě nebo v rozkládajícím se organickém materiálu), mnohonožky jsou hojné v mořských biotopech.

Trubicovité červy (Riftia pachyptila) lze naopak nalézt na mořském dně, kde tvoří symbiotický vztah se sirnými bakteriemi. Jiní červi existují jako parazité a lze je nalézt žijící v rostlinách a živočiších.

Mezi další vlastnosti spojené s červy patří např:

• Mají tělní dutinu známou jako coelom
• Většina druhů má trávicí soustavu
• Mají nervovou soustavu
• Těla jsou vytvořena z primárních zárodečných vrstev

Mezi několik příkladů červů patří např:

• Zemní červi
• Píďalky
• Polychaetičtí červi
• Pseudobiceros filgor
• Ploštěnky se žlutými papilami
• Háďátka

.

Cíle

Hlavním cílem pozorování červů pod mikroskopem je porovnat příslušníka každé skupiny červů (ploštěnky, Škrkavky a segmentované červy). To umožní studentům určit některé podobnosti a rozdíly mezi těmito červy. Na konci těchto aktivit by studenti měli být schopni:

Vědět, jak používat mikroskop k pozorování vzorků

Pochopit, jak připravit vzorky pro mikroskopování

Srovnat a porovnat morfologii tří skupin červů

Před prohlížením červů pod mikroskopem se vždy doporučuje použít lupu, abyste získali rámcovou představu o tom, jak vzorek vypadá.

Lupa má sice ve srovnání s mikroskopem menší zvětšovací výkon, ale umožní vám několikanásobné zvětšení obrazu, abyste získali představu o celkové morfologii.

– Lupa – typická lupa má zvětšovací schopnost 1× až 2×

– Petriho miska

– Pár pinzet

– Vzorek: Žížala (segmentovaná žížala), ploštice planární a úhoř (oblá žížala)

– Pár rukavic (nitrilová guma)

– Nádoba

– Sítko

– Mini zahradní lopatka

* Tři druhy žížal byly vybrány, protože je lze snadno nalézt (Žížaly; vyskytují se na zahradách a ve volné půdě, ploštice planární lze nalézt v mělkých vodách, rybnících a řekách, zatímco úhoři mohou napadat různé plodiny, např.např. rajčata) a jsou bezpečné pro manipulaci. Navíc reprezentují jednotlivé skupiny a usnadní vám proces porovnávání.

Postup: Odběr vzorku

– Pro odběr vzorku můžete použít pár rukavic. Je to však nepovinné vzhledem k tomu, že tito červi jsou většinou neškodní.

– Pomocí mini zahradní lopatky opatrně prohrábněte zahradu nebo volnou vlhkou půdu a najděte jednu nebo několik žížal.

– Pomocí pinzety žížaly opatrně seberte a vložte je do Petriho misky (možná budete muset Petriho misku částečně zakrýt, aby žížaly neunikly).

– Pro sběr ploštic (Planarian flatworms) použijte nádobu, do které natáhnete vodu z mělkého jezírka nebo řeky. Zde se budete muset na vodu v nádobě podívat zblízka (můžete použít lupu), abyste zjistili, zda se vám podařilo červa získat. Důvodem je jejich malá velikost, která se pohybuje od 3 do 15 mm. V závislosti na druhu mohou mít černou, šedou nebo hnědou barvu.

– Jakmile si budete jisti, že jste ploché červy v nádobě nasbírali, můžete vodu přesít, abyste červy snadno vybrali, a uchovávat je v Petriho misce (ujistěte se, že každý druh červa je uchováván v jiné Petriho misce) – Do Petriho misky můžete přidat trochu vody, abyste červy uchovali.

– Ve srovnání s ostatními dvěma druhy může být sběr úhořích červů náročný vzhledem k tomu, že jsou pouhým okem sotva viditelní (0,4-1,2 mm). Červy však lze sbírat identifikací infikované plodiny (rajčata nebo rebarbora, brambory atd.).

K sběru úhořů lze použít následující kroky:

– Opatrně rozlomte infikovanou část plodiny (např. rajče, brambory, brambory apod.). listy) na drobné kousky

– Umístěte listy do skleněné nádoby s vodou asi na 30 minut

– Po 30 minutách, budete pozorovat úhoře (ve shluku) pohybující se na dně nádoby

– Opatrně vylijte vodu a dávejte pozor, abyste neztratili hmotu úhořů

.

– Úhoří červy můžete ponechat v nádobě nebo je pak opatrně vysypat do Petriho misky s malým množstvím vody

– Jakmile nasbíráte celý vzorek v každé Petriho misce, pečlivě pozorujte pomocí lupy – To můžete provést, když jsou červi v Petriho misce

Pozorování

Pod lupou budou jasně patrné segmenty po celé délce těla červa. Tyto segmenty umožňují organismu kroutit se a pohybovat se. Pokud pozorujete červa při dobrém osvětlení, můžete být také schopni matně identifikovat některé vnitřní orgány červa (např. cévy). Některé druhy však mohou mít tmavší epidermis, takže je obtížné cokoli vidět.

V přední části těla si všimnete úzké a špičaté mrtvolky (menší ve srovnání s ostatními tělními články). V blízkosti střední části těla si také všimnete výrazného segmentu, který se zdá být zduřelý a světlejší barvy ve srovnání s ostatními segmenty. Tento segment se nazývá clitellum a podílí se na rozmnožování.

Mezi další části, které lze zjistit pomocí lupy, patří např:

• Setae – struktury podobné chloupkům na každém segmentu
• Válcovité tělo

Ploštice

Ačkoli mají protáhlé tělo, jsou tyto ploštice mnohem menší (3 až 15 mm) ve srovnání s žížalami se zploštělým (listovitým) tělem. Oproti přední části (která může být široká) je zadní konec (ocas) více zašpičatělý. Při bližším pohledu lze také odhalit oční skvrny v oblasti hlavy a také hltan umístěný blízko středu (centrální části těla)

Úhořovci

V porovnání s žížalami a planárkami jsou úhořovci výrazně menší. Z tohoto důvodu by bylo obtížné rozlišit jednotlivé části těla pod lupou. Lze je však pozorovat, jak se pohybují ve skupině.

Žížala pod mikroskopem

Pomocí mikroskopu budete moci pozorovat vnější i vnitřní (pomocí pitvy) anatomii žížaly.

Požadavky/materiál

• Vzorce žížaly
• Alkoholový roztok
• Mikroskop
• Skleněné sklíčko
• Voda
• A. Pinzeta

Postup přípravy

– Do Petriho misky

– Pomocí pinzety naneste roztok alkoholu (1 díl alkoholu a 9 dílů vody), vyberte jednu žížalu a umístěte ji do roztoku alkoholu – Cílem tohoto kroku je usmrtit žížalu v rámci přípravy na mikroskopování

– Vyberte žížalu a umístěte ji do vody (Petriho miska s vodou) – Cílem tohoto kroku je smytí případných nečistot nebo hlenu na epidermis

Stereomikroskopie

Pro pozorování vnější anatomie žížaly, lze použít stereomikroskop:

Postup

– Umístěte červa do Petriho misky

– Otočte otočným revolverem a nastavte objektiv s nejmenším zvětšením na místo

– Opatrně umístěte Petriho misku na stolek

– Při pohledu okulárem, jemně otáčejte knoflíkem zaostřování, abyste obraz zaostřili

– Intenzitu světla můžete upravit nastavením kondenzoru

– Jakmile je obraz zaostřen, pokuste se najít přední konec žížaly a poté pohybujte stolkem, abyste prozkoumali anatomii zbytku těla

– Nastavte velké zvětšení a postup opakujte, abyste si žížalu prohlédli zblízka a zaznamenali svá pozorování

* Výše uvedené kroky můžete zopakovat s živou žížalou a pozorovat pohyb žížaly (jak se pohybuje tělo a ústní části).

Pozorování

Při větší síle zvětšení je na přední části žížaly vidět masitý hrbolek. Ten se nazývá prostomium a nachází se kolem ústní části červa. Řitní otvor se nachází na zadním konci. Pod mikroskopem je také vidět přepážka oddělující drobné tělní segmenty červa.

V porovnání s hřbetní částí si také všimnete, že břišní povrch (který je zaoblený a tmavší) červa je plošší. Na druhé straně budou také snadno viditelné setae (drobné štětinky podobné chloupkům) a póry (póry na každém segmentu těla). Kromě pórů na tělních segmentech byste měli zřetelně vidět i větší póry (genitální póry) v blízkosti přední části červa.

Pitva žížaly

Pitvání žížaly usnadní studium její vnitřní anatomie.

Požadavky/materiál

• Pitevní špendlíky
• Specifikum
• Pitevní nůž/čepele nebo pitevní nůžky
• Mikroskop

.

• Disekční miska
• Pár kleští

Postup

• Položte vzorek na pitevní misku hřbetní stranou nahoru
• Pomocí pitevních kolíků, zajistěte oba konce na místě – To bude zahrnovat připnutí obou konců exempláře tak, aby během pitvy zůstal na místě
• Pomocí čepele, opatrně odstřihněte malý otvor pod klitorisem
• Pomocí kleští nadzvedněte kůži, abyste mohli snadno zasunout pitevní nůžky a odstřihnout epidermis podél přímé linie směrem k hlavě a opět směrem k zadnímu konci
• Pomocí kleští, oddělte epidermis a opatrně ji připíchněte do zásobníku – bude zapotřebí několik kolíků, aby byla dobře vidět vnitřní anatomie červa

* Pozorujte vzorek pod mikroskopem podle výše uvedených kroků.

Pozorování

Pod mikroskopem bude možné určit několik znaků vnitřní anatomie.

Mezi ně patří:

– Aortální oblouky (srdce) – pět tmavých smyček obklopujících jícen slouží jako srdce červa

– Hltan – nachází se v přední části červa uvnitř úst. Skládá se z několika svalů a bude se jevit jako světle zbarvený orgán

– Reprodukční orgány – nacházejí se v blízkosti srdce, budou vypadat jako lehce zbarvená tkáň nebo drobné bílé orgány

– Žaludek – je umístěn za plodnicí (slouží k ukládání potravy)

– Střevo – dlouhá trubice vedoucí od žaludku směrem k zadní části těla

– Centrální nervový provazec – je umístěn na hřbetní části těla, lze ji snadno spatřit, když pohnete střevem do strany (Nervová šňůra bude vypadat jako dlouhá bílá šňůra)

Planární ploštice pod mikroskopem

Příprava dočasných preparátů

• Mikroskopická sklíčka
• Mikroskopický krycí list

.

• Agar
• Složení mikroskopu
• Vazelína
• Voda

Postup

* Tato technika se používá k pozorování živých červů

– Na čisté podložní sklíčko přidejte kapku horkého agaru (4 až 5 procent agaru). Agar používaný pro tuto techniku se skládá z Oxoid Agar Technical a síranu měďnatého

– Pomocí dalšího čistého sklíčka, srovnejte agar

– Jakmile agar ztuhne, opatrně odstraňte sklíčko (sklíčko použité ke srovnání agaru)

– Pomocí kapátka, přidejte na agar kapku vody

– Opatrně vložte ploštici na kapku vody a přikryjte krycím sklíčkem

* Aby se zabránilo pohybu ploštice, lze na okraj krycího sklíčka před jemným přitlačením přidat trochu vazelíny: Dávejte pozor, abyste vzorek nerozmačkali.

Mikroskopování

Po přípravě sklíčka je dalším krokem pozorování vzorku pod mikroskopem.

To bude zahrnovat následující kroky:

– Před upevněním preparátu, otočte revolverem, abyste nastavili objektiv nejnižšího výkonu na místo

– Opatrně umístěte preparát na stupnici a udržujte jej na místě pomocí klipů

– Podívejte se okulárem a otočte knoflíkem zaostřování, abyste obraz zaostřili

– Pomocí knoflíku pro nastavení stupnice, jemně pohybujte stolkem, abyste si mohli prohlédnout různé části preparátu

– Přepněte na větší zvětšení a pozorujte preparát

– Před vyjmutím preparátu snižte stolek

Pozorování

Při použití mikroskopu si všimněte, že tělo tohoto červa se zdá být zploštělé (připomíná protáhlý plochý list). Lze také pozorovat oční skvrny, které se nacházejí v hlavové části (přední část červa). Tyto pigmentové řezy jsou citlivé na sluneční světlo a fungují tedy jako oči.

V závislosti na druhu může být hlava po stranách zašpičatělá. Tyto hroty se nazývají ušní boltce a slouží jako smyslové struktury podílející se na čichu a hmatu. Ve střední části by také mohlo být možné spatřit hltan, který se podílí na krmení.

Škrkavky (oblé červy) pod mikroskopem

Škrkavky jsou v porovnání s ostatními výše popsanými červy mnohem menší. Lze je vypěstovat pomocí kultivačních médií a poté je prohlédnout pomocí mikroskopu.

Požadavky/materiál

• Jablečný ocet
• Úhoři
• Skleněná kultivační miska
• Pipeta
• Jablko

Postup

– Pomocí pipety, přidejte asi 200 ml octa do čisté skleněné kultivační nádoby

– Nakrájejte několik plátků jablek a přidejte je do skleněné nádoby

– Vložte do nádoby úhoře a přikryjte ji (nádobu přikryjte volně, aby se zpomalilo odpařování)

– Provzdušněte kulturu pomocí čisté pipety (aby se do kultivačního média dostal vzduch)

* Pozorováním Petriho misky (s tmavým papírem pod Petriho miskou) pod stereoskopem, je možné pozorovat červy

Požadavky/Materiál

• Specifikum (úhoří červi)
• Komponentní mikroskop
• Kropítko
• Skleněné sklíčko mikroskopu

Postup

• Pomocí kapátka, zkuste nasbírat několik červů na dně Petriho misky (v kapalné kultuře)
• Naneste asi 2 kapky kapaliny na několik sklíček
• Namontujte sklíčko na stolek mikroskopu (pomocí výše uvedených kroků) a pozorujte nejprve při malém zvětšení, než přepnete na větší zvětšení

Pozorování

Je-li přítomen červ, všimněte si, že má průhlednou epidermis. Ve srovnání s tělem ploché hlístice bude úhoř válcovitý (trubicovitý) se špičatou zadní částí. Při větším zvětšení lze odhalit ústní část v její přední části a také střevo vybíhající z jícnu směrem k zadní části těla.

Závěr

V našem okolí se vyskytuje mnoho druhů červů. Někteří jsou parazitičtí, zatímco mnoho jiných existuje jako volně žijící organismy. Doporučujeme vám proto nasbírat ve svém okolí různé druhy červů (nebo si dokonce objednat jiné na internetu) a porovnat jejich anatomické vlastnosti, abyste zjistili, jak přežívají ve svém prostředí.

Podívejte se také na další nápady: Co vypadá cool pod mikroskopem, Další zábavné pokusy pod mikroskopem

Zpět k poznávání plochých červů

Zpět k poznávání škrkavek, známých také jako Nematody

A pochopit nematologii

Zpět z Červi pod mikroskopem na úvodní stránku MicroscopeMaster

Flinnsci. (2016). Kultivace octomilek Průvodce péčí o živý materiál.

Gilbert A. Castro. (1994). Kapitola 86Helminty: Struktura, klasifikace, růst a vývoj.

William T. Crow. (2012). Žížaly: Entomologie a nematologie.

Odkazy

.