Células Leveduras Sob o MicroscópioCaracterísticas, Habitat e Observação

O que é Levedura?

Células Leveduras são membros do Reino dos Fungos. São microrganismos com células (eucariotas) classificados em phyla Ascomycota(sac fungi) e Basidiomyota(higher fungi), ambos abrangidos pelo Reino Fungos Dikarya.

Células de levedura

• Reino – Fungos
• Reino – Kikarya
• Phyla – Ascomycota e Basidiomycota

* Levedura de brotação, também referida como verdadeira queda de levedura sob o Filo Acomycota e na Ordem Saccharomycetales

Yeast são muito diversas (mais de 1.500 espécies), sendo que apenas algumas são classificadas como Basidiomycota. As células de levedura reproduzem-se através da gema ou fissão binária que são métodos de reprodução assexuada (Horst, 2010).

Budding – Uma nova célula de levedura é formada através da divisão das células mitóticas e permanece ligada como uma gema na célula antiga até se dividir e se tornar independente.Aqui, a célula mãe produz um crescimento que finalmente se divide para se tornar uma célula idêntica independente da célula mãe.

Fissão binária – Na fissão binária, nenhum crescimento (botão) é formado. Ao contrário, através da mitose, o genoma se replica e se divide, seguido da formação de uma nova membrana plasmática e finalmente a célula se divide em duas para formar duas novas células da célula mãe.

* Alguns dos fungos referidos como tendência dimórfica alternam entre a fase de levedura e a fase hifálica, o que significa que eles também podem crescer como hifas (como fio)

Habitat

Por serem muito diversos, a levedura pode surgir em uma grande variedade de habitats, particularmente em ambientes com materiais ricos em açúcar. Elas podem ser encontradas em flores, folhas de plantas e frutas, bem como no solo, ambientes de mar profundo, superfície da pele e até mesmo em tratos intestinais de animais (com sangue quente).

Embora possam ser encontradas em muitos ambientes, as leveduras requerem ambientes úmidos com quantidades suficientes de nutrientes simples e solúveis para suportar o crescimento e a multiplicação (Horst, 2010).

Embora as leveduras como a Candica possam causar infecções (Candidíase), existem leveduras úteis, tais como:

• Levedura para panificação
• Levedura nutritiva
• Levedura para panificação
• Levedura para destiladores e vinhos

Levedura sob o microscópio

Requisitos

• Água
• Bolo de levedura
• Goteira
• Lâminas preparadas para microscópio e lamelas
• Manchas (indicadas abaixo)

Bolo de levedura contém Saccharomyces Cerevisiae(açúcar-fungo) e pode, portanto, ser usado para obter a levedura a ser observada ao microscópio. O seguinte é um procedimento que pode ser usado para preparar o espécime para observação.

• Beter bolo de levedura (este pode ser comprado em padarias ou supermercados)
• Cortar um pequeno pedaço de bolo de levedura e misturar com água para formar uma textura pastosa
• Adicionar um pouco mais de água toformar uma solução
• Utilizar um conta-gotas, coletar e colocar uma gota da solução em uma lâmina de microscópio
• Colocar uma lâmina de microscópio e observar sob uma lente de alta potência

Com Microscopia de Campo Brilhante

Ao visualizar o espécime sob altamagnificação (1000x e acima), veremos o organismo oval (em forma de ovo), que é a levedura. Também é possível observar os botões, que podem ser vistos em algumas das células da levedura.

Se a solução tivesse algum açúcar, também se notará algumas bolhas no espécime, que são como resultado do processo de fermentação pelos microrganismos.

Com microscopia de fluorescência

Microscopia de fluorescência pode ser usada para a observação das organelas dentro das células de levedura. Este é particularmente um grande método através do qual os alunos podem ver a distribuição intracelular da célula e identificar os diferentes tipos de organelas celulares.

Isto pode ser um pequeno desafio quando se trata de leveduras, dado que elas são muito pequenas em tamanho (comparado com outras células) e têm uma parede celular (Chalfie e Kain, 2005).

Para células vivas de leveduras, um número de corantes tem que ser usado a fim de aumentar o contraste e ser capaz de diferenciar as organelas diferentes nas células.

Estes incluem:

• DAPI para os núcleos
• FM4-64 para os vacúolos
• DIOC6 para o endoplasmicreticulum e mitocôndrias
• DASPMI para mitocôndrias
• Calcofluor Branco que ajuda a colorir a parede celular

Yeast estão entre as menores células eucarióticas com diâmetros entre 5 e 10um. Por esta razão, é importante vê-las sob alta ampliação usando microscopia de fluorescência.

Aqui, 60x ou 100x com abertura numérica de 1,4 são recomendadas para observação visual e máxima luminosidade e resolução respectivamente.

Se a gravação usar uma câmera digital (por exemplo, usando uma câmera de 6,8 x 6,8 um pixel quadrado), então uma ampliação de 60x seria recomendada com abertura numérica de 1.4 (Hašek, 2006).

Veja também:

Micologia em geral como campo de estudo

Fungi – Tipos, Morfologia e Estrutura, Usos e Desvantagens

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Volta de Levedura sob o Microscópio para Experiências Microscópicas

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